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    Isolement et caractérisation de bactéries productrices de protéase
    (2020) BOUKERCHE Maghnia; MOSTARI Radjâa; Encadreur : KANOUN Khedoudja
    Résumé : ( Français ) La demande industrielle des préparations actives des enzymes protéolytiques, produites par des microorganismes appropriées, aux pH et aux températures extrêmes stimule à continuer la recherche de nouvelles souches productrices de protéase à intérêt biotechnologique. Ces enzymes constituent un rôle important dans divers utilisations commerciales, telle que l’industrie pharmaceutiques et les traitements des eaux usées industrielles. La présente étude devrait porter sur l’isolement et la caractérisation des bactéries protéolytiques. Dans cette optique des échantillons devraient être prélevés à partir de sols riches en protéines et de source thermale, au niveau de la région de Sidi-Bel-Abbès et d’Ain Temouchent en Algérie. La première partie devrait consiste à purifier les souches bactériennes ayant une activité protéolytique par un screening primaire. Après isolement et purification des isolats sur gélose nutritive additionnée au lait écrémé, on devrait passer à la sélection des souches les plus performantes, par mesure de la zone d’hydrolyse, sur un milieu spécifique à la production de l’enzyme protéase. L’identification phénotypique des souches sélectionnées est devrait basée sur plusieurs critères, qui sont définies par différentes techniques : l’étude macroscopique et microscopique des isolats, la détermination du type respiratoire, la mobilité, la formation des spores ainsi que l’étude des caractères biochimiques tel que la recherche de catalase et d’oxydase, ainsi que l’utilisation de la galerie API20E pour définir le genre des isolats. La production de l’enzyme est estimée par le dosage de l’activité protéolytique, sur le milieu de production liquide. L’activé enzymatique devrait mesurée a l’aide d’un spectrophotomètre, qui nous permet aussi d’étudier les propriétés de l’enzyme protéase tel que le pH, la température et la durée d’incubation optimale, pour une production enzymatique maximale. L’étude rétrospective que nous avons faite s’avère que, la plupart des bactéries productrices de protéase sont des bactéries à Gram positif comme Bacillus sp. Mots clés : protéase, caractérisation, bactéries protéolytique, identification, activité protéolytique. Abstract : ( Anglais ) The industrial demand for active preparations of proteolytic enzymes, produced by appropriate microorganisms, at pH and temperature extremes, stimulates further research into new protease-producing strains of biotechnological interest. These enzymes play an important role in various commercial industry and industrial wastewater treatment. The present study focused on the isolation and characterization of proteolytic bacteria. With this in mind, samples were taken from soils rich in proteins and from a thermal spring, in the region of Sidi-Bel-Abbes and Ain temouchent in Algeria. The first part consists in purifying the bacterial strains having a proteolytic activity by a primary screening. After isolation and purification of the isolates on nutrient agar added to skimmed milk, the selection of the best performing strains is carried out, by measuring the hydrolysis zone, on a medium specific to the production of the protease enzyme. The phenotypic identification of the selected strains is based on several criteria, which are defined by different techniques: the macroscopic and microscopic study of the isolates, the determination of the respiratory type, the mobility, the formation of the spores as well as the study of the biochemical characters such as the search for catalase and oxidase, as well as the use of the API20E gallery to define the genus of isolates. The production of the enzyme is estimated by assaying the proteolytic activity on the liquid production medium. The enzymatic activity is measured using a spectrophotometer, which also allows us to study the properties of the protease enzyme such as pH, temperature and optimal incubation time, for maximum enzyme production. The retrospective study that we made turns out that most of the bacteria producing protease are bacteria with Gram positive such as Bacillus sp. Keywords: protease, characterization, proteolytic bacteria, identification, proteolytic activity .
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    L’Anémie Hémolytique Auto Immune chez l’enfant : Aspects épidémiologiques et thérapeutiques dans le service de pédiatrie du CHU de Sidi-Bel-Abbès
    (2021) IDI Gambo Aicha; Encadreur : KANOUN Khedoudja
    Résumé : ( Français ) L’anémie hémolytique auto immune (AHAI) est une maladie très rare comparativement aux autres maladies auto-immune, malgré sa rare incidence, cette maladie reste la plus fréquente des anémies hémolytiques acquise. Cette maladie est beaucoup plus idiopathique que secondaire (69% idiopathique contre 31% secondaire). Elle est la plus fréquente des anémies hémolytiques extra-corpusculaires chez l’enfant. Elle désigne, par définition, une anémie secondaire à la destruction des globules rouges par des anticorps dirigés contre les antigènes érythrocytaires autologues du patient. Le diagnostic se résume, en pratique, à la constatation, au cours d’une anémie type hémolytique, d’un TDA positif après exclusion des autres causes d’hémolyse. Nous avons réalisé une étude prospective portant sur 05 patients pris en charge dans le service de Pédiatrie du CHU de Sidi-Bel-Abbès sur une période allant de Février 2021 à Avril 2021. Ce travail a pour objectif d’étudier les paramètres épidémiologiques, clinique, paraclinique et thérapeutique des patients atteints d’anémie hémolytique auto immune chez l’enfant dans la région de Sidi-Bel-Abbès. Il s’agit d’une population d’âge moyen de 4±4.06 ans avec un sexe ratio F/H de 1,5. Le diagnostic est évoqué en présence d’un syndrome anémique, qui a été le motif de consultation chez tous les patients, avec un taux d’hémoglobine moyen au moment du diagnostic compris entre 5.0800±1.90578 g/dL (4 g/dL et 8,40 g/dL), et le TDA a été positif dans 40% des cas. La transfusion sanguine et la corticothérapie, qui constitue le traitement de 1ère ligne, ont été utilisées chez 100% de nos patients. Une réponse est observée chez tous les patients. Mots clé : Anémie Hémolytique Auto Immune – Hémolyse – Enfant - Prise en Charge . Abstract : ( Anglais ) Autoimmune hemolytic anemia (AHAI) is a very rare disease compared to other autoimmune diseases, despite its rare incidence this disease remains the most common acquired hemolytic anemia. This disease is much more idiopathic than secondary (69% idiopathic against 31% secondary). It is the most common extracorporeal hemolytic anemia in children. It designates, by definition, anemia secondary to the destruction of red blood cells by antibodies directed against the patient's autologous erythrocyte antigens. The diagnosis is summed up, in practice, to the observation, during a hemolytic type anemia, of a positive DAT after exclusion of other causes of hemolysis. We conducted a prospective study on 05 patients treated in the Pediatrics department of the UHC of Sidi-Bel-Abbès over a period from February 2021 to April 2021. The objective of this work is to study the epidemiological and clinical parameters, paraclinical and therapeutic of patients with autoimmune hemolytic anemia in children in the region of Sidi-Bel-Abbès. It is a population with a mean age of 4 ± 4.06 years with a sex ratio F / M of 1.5. The diagnosis is suggested in the presence of an anemic syndrome, which was the reason for consultation in all patients, with an average hemoglobin level at the time of diagnosis of between 5.0800 ± 1.90578 g / dL (4 g / dL and 8, 40 g / dL), and DAT was positive in 40% of cases. Blood transfusion and corticosteroid therapy, which is the first-line treatment, were used in 100% of our patients. A response is observed in all patients. Key words: Auto Immune Hemolytic Anemia - Hemolysis - Child - Management