Rôle des lipoprotéines de haute densité dans l’inhibition des interactions macrophages/lymphocytes T CD4+ au cours du diabète de type 1.
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Date
2018-02-15
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Résumé
Introduction :
Le diabète de type 1 est une maladie inflammatoire des îlots pancréatiques. Les lymphocytes T
CD4+ et les macrophages sont principalement impliqués dans la destruction auto-immune des
cellules β dans le Diabète de type 1 (DT1). Bien que certains travaux aient postulé l’existence d’un
effet inhibiteur du HDL sur la capacité des cellules présentatrices d’antigènes à stimuler l'activation
des lymphocytes T, aucune investigation démontrant l’impact du HDL sur le DT1 n’a été menée à ce
jour.
Objectif :
Le but cette étude consiste, d’une part à examiner l'effet ex vivo des lipoprotéines de haute densité
(HDL) sur les activités fonctionnelles des macrophages et d’autre part à étudier leurs capacités à
réguler la production des cytokines dans les co-cultures de macrophages-cellules T dans le diabète
précoce de type 1.
Matériels et méthodes :
L'effet du HDL a été examiné aussi bien sur des macrophages que sur des co-colutures
macrophages /lymphocytes T CD4 + isolés, chez des donneurs volontaires sains et chez des
diabétiques de types 1 nouvellement diagnostiqués. Certains des dosages ont été effectués sur les
surnageants, d’autres sur les lysats cellulaires traités ou non avec le HDL. Les niveaux de production
des cytokines, d’arginase, de l’activité fonctionnelle du macrophage et des quantités relatives des
transducteurs de signal STAT4/STAT6 ont été réalisés sur des co-cultures.
Résultats:
les résultats des essais ont montré que les niveaux de production des cytokines pro-inflammatoires
(IL-1β, d'IL-2, d'IFN-γ) ; ceux des paramètres du burst oxydatif (NO et H2O2), ceux de la phagocytose
et de la destruction bactérienne ainsi que ceux de la phosphorylation de STAT4 (p-STAT4, Tyr693),
ont été réduit de manière significative dans les co-cultures de macrophages/lymphocyte T CD4+ des
DT1 traité avec HDL par rapport aux contrôles sains (p<0.01). Les résultats ont montré en outre, que
le traitement par HDL a induit une légère augmentation des taux de ifCa2 + dans les co-cultures de
DT1 par rapport aux témoins sains, malgré une différence peu significative (p>0,05). Ils ont montré
d’autre part que le traitement par HDL a induit une augmentation significative sur la production des
cytokines anti-inflammatoires (IL-4, et IL-10), sur l’activité d'arginase et sur la phosphorylation des p-
STAT6 (Tyr641) dans la co-culture de cellules de DT1 et de témoins sains par rapport à celle des
cellules non traitées par HDL (pour toutes les Comparaisons, (p <0,001)).
Conclusions : Les résultats obtenus sont prometteurs car ils permettent de démontrer pour la
première fois que le HDL peut inverser à la fois les activités fonctionnelles des macrophages et la
réponse immuno-inflammatoire au début du DT1. Ces résultats précurseurs devraient ouvrir la voie à
des essais thérapeutiques à court et à moyen terme.
Mots clé : HDL, diabète de type 1 humain, macrophages / lymphocytes T CD4 +, activités
fonctionnelles des macrophages, cytokines pro-inflammatoire et anti-inflammatoire, p-STAT4 et p-
STAT6
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Abstract
Background.
Both CD4+ T cells and macrophages are mainly involved in the autoimmune-mediated β-cells
destruction in type 1 diabetes (T1D). The aim of this study was to examine the effect of HDL on
functional activities of macrophage and its ability to regulate the production of cytokines in autologous
mixed macrophage/CD4+ T cells at the recent-onset human type 1 diabetes.
Methods. Cell samples were isolated from volunteers with recent-onset T1D or healthy controls.
Results.
The levels of the production of IL-1β, IL-2, IFN-γ, nitric oxide (NO), and hydrogen peroxide (H2O2)
were significantly increased in the co-culture of T1D cells when compared to that of cells from healthy
controls. Similarly, those of intracellular free calcium ions (ifCa2+) were slightly, but not significantly
increased (p > 0.05). Conversely, macrophage exhibited significantly decreased levels of the relative
tyrosine phosphorylation of STAT6 (p-STAT6, Tyr641) in culture of T1D cells than in that of cells from
healthy controls; while those of p-STAT4 (Tyr693) were significantly increased. Likewise, the levels of
IL-4 and IL-10 were significantly decreased in the co-culture of T1D cells compared to co-culture of
cells from healthy controls. Additionally, HDL treatment significantly down-regulated the production of
IL-1β, IL-2, IFN-γ, NO, H2O2, phagocytosis, bacterial killing, the relative tyrosine phosphorylation of
macrophage-expressed STAT4 (p-STAT4, Tyr693), as well as the ratio of IL-1β/IL-10, NO
production/arginase activity, p-STAT4/p-STAT6, IFN-γ/IL-4, IFN-γ/IL-10, and the combined
proinflammatory (PICs)/anti-inflammatory (AICs) cytokines. Moreover, HDL treatment significantly up-
regulated the production of IL-4, IL-10, arginase activity, and p-STAT6 (Tyr641) (for all comparisons,
p < 0.001).
Conclusions.
We show for the first time that HDL may reverse both the functional activities of macrophages and
immunoinflammatory response during reciprocal macrophage-CD4+ T cell crosstalk at the beginning
of T1D. These findings should open the way for therapeutic trials in the short- and medium-term.
Keywords. Autologous mixed macrophage/CD4+ T cells, HDL, Human type 1 diabetes, Macrophage
functional activities, Proinflammatory and anti-inflammatory, cytokines, p-STAT4 and p-STAT6
Description
Doctorat
