- [ VRPG-Doc-Sc] Sciences biologiques --- علوم بيولوجية

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Effet de synergie des bactériocines issues des bactéries lactiques et pseudolactiques et des huiles essentielles d’Inula viscosa contre les germes pathogènes.
(2016-05-25) MEKRI Meriem; Encadreur: ABBOUNI Bouziane; Co-Encadreur: DOUMANDJI Amel
Résumé (Français et/ou Anglais) : Dans ce présent travail, l’effet de synergie des bactériocines produites par des bactéries lactiques isolées du lait de chèvre Algérien et les huiles essentielles d’Inula viscosa a été mis en évidence. Les trois bactéries lactiques isolées appartiennent aux espèces suivantes : Streptococcus thermophilus (BL16), Pediococcus acidilactici (BL20) et Enterococcus faecium (BL50). L’étude de l’activité antagoniste des trois bactéries lactiques sélectionnées antagonistes vis-à-vis de B. cereus , St. aureus ATCC 25932, E. coli et Ps. aeruginosa ATCC 27853 a montré que B. cereus et St. aureus ATCC 25932 se manifestent sensibles aux bactériocines des bactéries lactiques. Cependant, E.coli et Ps. aeruginosa ATCC 27853 ont manifesté une résistance contre les bactéries lactiques antagonistes. La caractérisation physico-chimique des substances responsables des activités antagonistes des trois souches a montré la présence d’une substance de nature protéique, caractérisée par sa thermorésistance et une valeur de pH optimale comprise entre 4-7, ce qui suggère que cette substance inhibitrice est de type « Bactériocine ». L’étude du suivi de la cinétique de croissance bactérienne et le mode d’action des bactériocines a montré la présence d’une corrélation entre la production de la biomasse bactérienne et la sécrétion de bactériocine dans le surnageant du milieu de culture MRS liquide. Les bactériocines produites par de Streptococcus thermophilus (BL16), Pediococcus acidilacticci (BL20) et Enterococcus faecium (BL50) ont manifesté un effet bactériostatique et bactéricide sur St. aureus ATCC 25932 respectivement. L’extraction des huiles essentielles d’Inula viscosa réalisée par hydrodistillation a donné un rendement de 0.2 %. Les résultats de l’analyse par CG/SM de l’huile essentielle ont permis la caractérisation des principaux composés. Les (CMI) et (CMB) sont comprises entre 0.3-1.25 mg.ml-1 et 0.6-5 mg.ml-1 respectivement. L’étude de la dynamique d’action des huiles essentielles d’Inula viscosa a montré que l’effet bactéricide des huiles essentielles dépend du temps. L’effet de synergie entre les bactériocines des bactéries sélectionnées (BL16, BL20, et BL50) et les huiles essentielles d’Inula viscosa étudié selon le test en damier, a affiché une synergie (FICI <0.5) pour St. aureus ATCC 25932, B. cereus et Ps. aerugenosa ATCC 27853. En conclusion, la combinaison des bactériocines et les huiles essentielles d’Inula viscosa pourrait être considérée comme une alternative prometteuse dans l’industrie alimentaire capable d’empêcher la prolifération des bactéries à Gram (-) responsable d’altération des aliments.
CARACTERISATION PHYSICOCHIMIQUE, PALYNOLOGIQUE ET EFFETS ANTIBACTERIEN, ANTIOXYDANT ET IMMUNOMODULATEUR DES MIELS DE LA REGION OUEST D’ALGERIE.
(2016-12-07) MEHDI YAMINA; Encadreur: BENALI Mohamed
Résumé (Français et/ou Anglais) : Le miel, un produit complexe, extrêmement riche, possède de nombreuses propriétés cosmétiques, nutritionnelles et thérapeutiques. Notre étude est réalisée sur neuf échantillons de miel récoltés de différentes régions de l’ouest algérien afin de caractériser leurs propriétés physicochimiques (densité, teneur en eau, matière sèche, acidité totale, cendre, conductivité électrique, sucres, HMF, polyphénols et flavonoïdes), de déterminer le niveau des éléments traces métalliques (ETM) (Fe, Cu, Mg, Zn, Ni et certains métaux toxiques Pb et Cd) et la recherche de résidus de chloramphénicol. Par ailleurs, une analyse pollinique permettant de déterminer l’origine botanique de ces miels est effectuée. Aussi une détermination des vertus thérapeutiques in vitro et in vivo de ces miels (activités antioxydante, immunomodulatrice et antibactérienne) est mise en évidence. Les résultats d’analyses physicochimiques, du dosage des ETM toxiques et des résidus de chloramphénicol ont montré la conformité des miels étudiés aux normes internationales du codex alimentarius à l’exception du miel N°08 qui présente des traces de chloramphénicol. L’analyse palynologique a permis d’identifier cinq miels monofloraux et quatre multifloraux avec une dominance de l’Eucalyptus sp., Foeniculum vulgare, Hedysarum coronarium, Olea europea, Ziziphus jujuba , Daucus carota, Taraxacum officinale, Brassica napus, Matricaria recutita, et Papaver rhoeas comme espèces omniprésentes dans la région de l’ouest Algérien. Tous les miels étudiés présentent une activité antioxydante considérable avec un I% élevé pour le miel N°03 (27,289%) qui est corrélé (R2=0,99) avec sa teneur élevé en polyphénols. L’effet immunomodulateur du miel a été prouvé in vivo avec le même échantillon qui montre une diminution significative (p< 0,01) du taux des IgG Anti-OVA chez les souris Balb/c injectées de 100µl de miel 06h avant, 06h après et en même temps que l’immunisation par l’antigène OVA. L’étude in vitro de l’effet antibactérien de ces miels indique qu’ils possèdent un effet inhibiteur sur la croissance de bactéries pathogènes Gram+ (Bacillus cereus, Staphylococcus hominis) qui sont plus sensibles que ceux Gram- (Escherichia coli et Proteus mirabilis). Cependant Pseudomonas aeruginosa et Enterobacter cloacae montrent une résistance aux différents miels testés mais sont inhibées ou éliminées à des concentrations élevées (>40%). Ces résultats ouvrent une perspective intéressante dans le domaine clinique et suggère l'utilisation potentielle du miel comme un alicament en technologie agro-alimentaire.
Epidémiologie et Intérêt de détection des papillomavirus à haut risque (HPV HR) par immunohistochimie et biologie moléculaire dans le diagnostic des lésions cancéreuses du col utérin
(2016-11-22) MEDLES Meriem; Encadreur: Bendahmane SALMI Malika
Résumé (Français et/ou Anglais) : Résumé Le cancer du col utérin est l’un des rares cancers humains évitables, en effet sa prévention repose sur le diagnostic précoce des lésions précancéreuses et au préalable sur l’examen cytologique du frottis cervico-vaginal or, il est prouvé que la sensibilité de ce dernier ne dépasse pas 60 %. Plus récemment, un nombre inacceptable de cancers invasifs ont été observés chez des femmes régulièrement contrôlées par frottis, d’où la nécessité de recourir à des techniques plus performantes de dépistage. Notre objectif était de déterminer les différents facteurs de risque associés à la survenue du cancer du col d’utérus d’une part, et de faire une corrélation entre la détection virale et les données cyto-histologiques en étudiant la relation entre la charge virale et le grade histologique de la lésion cancéreuse et enfin, vérifier si la détection moléculaire de ce virus pouvait contribuer à améliorer le diagnostic des lésions précancéreuses du col utérin d’autre part. Notre travail est divisé en deux parties : la première partie concerne une étude rétrospective descriptive de 210 dossiers médicaux enregistrés entre 1998 et 2015 au niveau de service de gynécologie- obstétrique du CHU de Sidi-Bel-Abbès. La seconde partie consiste en une étude de détection de l’HPV HR par immuno-histochimie de 52 biopsies de patientes atteintes de carcinomes épidermoïdes et de dysplasies cervicales au niveau du service d’anatomopathologie de CHU de Sidi-Bel-Abbès, et la détection des HPVHR par biologie moléculaire (PCR et HCII) chez 115 femmes souffrant d’une pathologie cervicale recrutées au niveau des services de gynécologie de CHU d’Alger. Les résultats de l’étude épidémiologique indiquent que la majorité (96%) des cas présente un carcinome épidermoïde de type invasif, dont le symptôme le plus fréquent est l’apparition de métrorragie. L’âge moyen des patientes était de 50,4 ± 3,96 ans et que la tranche ménopausique était la plus touchée (56%). Parmi les facteurs les plus plausibles ont été signalés, la précocité de l’activité sexuelle (91%), la multiparité (60% plus de 5 grossesses). De même d’autres facteurs pourraient êtres incriminés tels que le vieillissement et le niveau socio-économique bas dans presque 50% des cas. La deuxième partie du travail montre que la recherche des HPV HR par immunohistochimie était positive dans presque 91% de carcinomes épidermoïdes et 84% des dysplasies cervicales, et la détection par PCR et le test HCII indique que 42,61% des femmes atteintes de problèmes cervicales s’avéraient positifs. Au terme de cette étude nous constatons que l’infection à HPV est largement incriminée dans les lésions pré-cancéreuses et cancéreuses du cancer cervical par contre, l’intensité du marquage, ne présente aucune corrélation entre le grade histologique de la lésion et l’âge des patientes. Un examen cytologique combiné à un test des HPV HR augmentera la sensibilité du dépistage et donnera une protection maximale face au cancer du col utérin. SUMMARY The cancer of the uterine collar is one of rare avoidable human cancers, indeed its prevention rests on the early diagnosis of the precancerous lesions and with the precondition on the cytological examination of the cervical smear, but it is proven that the sensitivity of this last does not exceed 60 %. More recently, an unacceptable number of invasive cancers were observed among women regularly controlled by smear, from where need for resorting to more powerful techniques of tracking. Our objective was to determine the various factors of risk associated with occurred with the cancer of the collar of uterus on the one hand, and to make a correlation between viral detection and the cyto-histological data by studying the relation between the viral load and the histological rank of the cancerous lesion, and to check if molecular detection this virus could contribute to improve the diagnosis of the precancerous lesions of the cervix on the other hand. Our work is divided into two parts: the first part relates to a retrospective study of 210 files recorded between 1998 to 2015 on the level of service of gynecology obstetric of CHU of Sidi-Bel-Abbès. The second part consisted of the immuno-labling of the HPV by immunohistochemistry technic of 52 biopsies coming from patients presenting of epidermoïde carcinoma and the cervical dysplasia at the level of the service of anatomopathology of CHU of Sidi-Bel-Abbès, and the detection of the HPVHR by molecular biology (PCR and HCII) among 115 women presenting a cervical pathology coming from the gynaecology department of Algiers. The results of the epidemiologic study indicate that the majority (96%) cases present epidermoide carcinoma of the invasive type, of which the most frequent symptom is the appearance of metrorragie. The average age of the patients was of 50,4 ± 3,96 years and that the menopausic section was touched (56%).Among the most plausible factors were announced, the precocity of the sexual activity (91%), the multiparity (60% more than 5 pregnancies).In the same way other factors could beings accused such as ageing and the socio-economic level low in almost 50% of the cases. The second part of work shows that the research of HPV HR by immunohistochemistry was positive in almost 91% of epidermoïdes carcinoma and 84% of the cervical dysplasia. Among the 115 affected patients, 42, 61% were found positive. Finally, this study confirmed that the infection with HPV is largely accused in the pre-cancerous and cancerous lesions of cervical cancer on the other hand, the intensity of marking does not present any correlation with the histological rank of the lesion nor with the age of the patients. In conclusion a cytological examination combined with a test of HPV HR will increase the sensitivity of tracking and will give a maxima protection against the cancer of the cervix.
Isolement, Identification et production des Polyhydroxyalcanoates (PHAs) chez le genre Bacillus.
(2015-12-13) MEDJEBER Nacera; Encadreur: ABBOUNI Bouziane
Résumé (Français et/ou Anglais) : Résumé en Français Les impacts environnementaux néfastes causés par les déchets plastiques est une préoccupation mondiales. Les polyhydroxyalcanoates (PHAs) semblent être des candidats potentiels pour remplacer certains plastiques conventionnels. Dans la présente étude, des souches du genre Bacillus caractérisées par leurs capacités de synthétiser des lipidiques intracellulaires ont été isolées à partir de quatorze (14) échantillons de sol et d’eau usée. Dans l’ensemble quatre-vingt-deux (82) isolats sont criblées avec une coloration spécifique au Noir Soudan B, 17 souches sont révélées positives pour le PHA, identifiés comme étant Bacillus cereus (8 souches), B. megaterium (8 souches) et B. mycoides (1 souche). Dans le cadre de la valorisation des déchets agroalimentaires, et la réduction des coûts de production de bioplastique ; la mélasse de canne, la mélasse de betterave et le moût des rebuts de datte ont été testé comme source de carbone. Une production maximale de polyhydroxalcanoates (PHAs) a été observée chez la souche D9 après 48h d’incubation en présence de 2% de glucose puis 3% de Mélasse de betterave (50% et 41% par mg de MSC respectivement). Cependant le maximum de croissance (0,98g/l) était observé avec 5% de moût des rebuts de datte. Sur la base des propriétés morphologique et physiologique ainsi sur l’amplification du gène 16S rDNA, la souche D9 a été reconnue comme étant Bacillus megaterium. Après extraction des polymères au chloroforme, une analyse quantitative/qualitative par gravimétrie et spectrométrie Raman indique les groupements chimique des PHB. Résumé en Anglais The impact of plastic waste for environment emerge as a world wild problem and a global challenge, Polyhydroxyalkanoates (PHAs) present potential candidates to replace some conventional plastics. In this study, Bacillus strains able of synthesizing intracellular lipids were isolated from fourteen (14) samples of soil and waste water, identified and selected based on Sudan Black B stain. Overall, eighty-two (82) isolates were screened, 17 strains revealed positive for PHA, classified as Bacillus cereus (8 strains), B. megaterium (8 strains) and B. mycoides (1 strain). As part of the enhancement of agro-food waste and the reduction of bioplastic production costs; cane molasses, beet molasses and must date scrap were tested as a carbon source. Maximum production polyhydroxalcanoates (PHA) was observed with the D9 strain after 48 hours incubation in the presence of 2% glucose and 3% beet molasses (50% and 41% per mg DCM respectively). However, the maximum growth (0.98 g / l) was found with 5% must of dates scrap. Based on morphological properties, physiological characteristics and the amplification of the 16S rDNA gene, the D9 strain has been identified as Bacillus megaterium. After chloroform extraction, a quantitative / qualitative analysis by gravimetric and Raman spectroscopy indicates the chemical groups of PHB.
Etude des propriétés biologiques de l’association du bêta-glucane de l’orge et des bactéries lactiques isolées du lait de chamelle chez les rats Wistar
(2019-01-31) MEBREK Saad; Encadreur: BENALI Mohammed
Résumé (en Français) : La prévalence mondiale du diabète sucré est en hausse. On sait que le stress oxydatif induit par le diabète affecte le foie, le pancréas, les reins et les organes reproducteurs pathologiquement. Il a été suggéré que les probiotiques et les fibres alimentaires en tant que prébiotiques jouent un rôle important dans la gestion du diabète et de ses complications. Dans ce contexte, l’objectif de cette étude est d’évaluer l’effet de l’administration de bêta-glucane extrait de l’orge (BBG) et trois souches de bactéries lactiques (LAB) isolées du lait de chamelle, seuls ou associés, sur l’équilibre glycémique et le métabolisme lipidique ainsi que des paramètres biochimiques sur des rats mâles Wistar normaux ou rendus diabétiques par l’injection de la streptozotocine. Trente-six rats mâles sont répartis en 06 groupes : contrôle négatif (rats non diabétiques non traités), contrôle positif (rats diabétiques sans traitement), groupe metformine (rats diabétiques traités avec 200 mg/kg P.C. de metformine), groupe LAB (rats diabétiques traités avec 10+8 UFC/mL), groupe de BBG (rats diabétiques traités avec 50 mg/kg P.C.), et groupe COMB traité par les deux composés (rats diabétiques traités avec 50 mg/Kg P.C. + 10+8 UFC/mL) pendant quatre semaines. A la fin de l’expérimentation, les rats sont sacrifiés et le sang est récupéré. Les résultats montrent que tous les traitements ont entrainé une diminution de l’hyperglycémie à environ 02 g/L au bout de 04 semaines. Le BBG a un effet très significatif sur le bilan lipidique en augmentant le HDL-CHL et en diminuant le taux du cholestérol total, les triglycérides et le LDL-CHL et par conséquent le risque des maladies cardiovasculaires. Le même effet positif est observé pour le dosage sanguin de l’urée et la créatinine. Le groupe traité par les LAB et le groupe COMB ont connu aussi un effet positif sur tous les paramètres lipidiques ainsi que les taux sériques de l’urée et la créatinine. Un effet positif sur les enzymes hépatiques (ASAT et ALAT) est également observé chez tous les groupes traités sans aucune différence statistiquement significative. Le groupe COMB enregistre une diminution significative dans la concentration du complément-C3 ainsi que le rapport Neutrophiles/lymphocytes (N/L) contrairement aux LAB qui n’ont aucun effet significatif sur ces deux paramètres. Le dosage sérique du peptide-C ne révèle aucun effet des différents traitements sur ce paramètre et par conséquent aucun effet sur les fonctions des cellules bêta du pancréas. En conclusion, le BBG et les LAB ont des effets sur l’hyperglycémie chez les rats diabétiques ainsi que sur d’autres complications, alors que leur association ne montre aucun effet synergique significatif sur les paramètres étudiés. Les mots clés : Bêta-glucane de l’orge, bactéries lactiques, lait de chamelle, diabète, effet synergique, rat Wistar, streptozotocine Abstract (en Anglais) : The global prevalence of diabetes mellitus is rising. It is known that the oxidative stress induced by diabetes affects the liver, pancreas, kidneys and reproductive organs pathologically. It has been suggested that probiotics and dietary fiber as prebiotics play an important role in the management of diabetes and their complications. In this context, the objective of this study is to evaluate the effect of the administration of beta-glucan extracted from barley (BBG) and three strains of lactic acid bacteria (LAB) isolated from camel milk, alone or associated, on glycemic and lipid metabolism as well as biochemical parameters on normal Wistar male rats or streptozotocine induced diabetic rats. Thirty-six male rats were divided into 06 groups: negative control (non-diabetic rats untreated), positive control (diabetic rats without treatment), metformin group (diabetic rats treated with 200 mg/kg BW of metformin), LAB group diabetic rats treated with 10+8 CFU/mL), BBG group (diabetic rats treated with 50 mg/kg BW), and COMB group treated with both compounds (diabetic rats treated with 50 mg/kg BW + 10+8 CFU/mL) for four weeks. At the end of the experiment, the rats are sacrificed and the blood is removed. The results show that all treatments decreased hyperglycemia to about 02 g/L after 4 weeks. BBG had a very significant effect on lipid status by increasing HDL-CHL and decreasing total cholesterol, triglycerides and LDL-CHL and therefore the risk of cardiovascular disease, the same positive effect is observed for blood dosage of urea and creatinine. The group treated with LAB and the COMB group also had a positive effect on all lipid parameters as well as serum urea and creatinine levels. A positive effect on liver enzymes (ASAT and ALAT) is also observed in all treated groups without any statistically significant difference. The COMB group recorded a significant decrease in the C3 complement concentration and the Neutrophils/lymphocytes (N/L) ratio, unlike LABs, which have no significant effect on these two parameters. The serum determination of the C-peptide reveals no effect of the different treatments on this parameter and consequently no effect on the functions of the beta cells of the pancreas. In conclusion, BBG and LAB have effects on hyperglycemia in diabetic rats as well as other complications, whereas their association shows no significant synergistic effect on the studied parameters. Keywords : Barley beta-glucans, lactic acid bacteria, camel milk, diabetes, synergetic effect, rat Wistar, streptozotocine