- [ VRPG-Doc] Sciences biologiques --- علوم بيولوجية

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Impact de la carence en fer et l’infection sur le système immunitaire Chez des enfants: production des siderophores par Pseudomonas
(2015-11-30) Rahmani Soraya; Encadreur: DEMMOUCHE Abbassia
Résumé (Français et/ou Anglais) : En vue de réaliser une évaluation sur le terrain du statut en fer des enfants âgés de 2 ans à 12 ans et du retentissement d’une éventuelle carence en fer sur le système immunitaire, deux études prospectives ont été effectuées.la première étude fut réalisée au niveau de l’EHU d’Oran et avait pour objectif de chercher la corrélation entre les différents paramètres de statut en fer et les immunoglobulines et la seconde a été réalisée au service de pédiatrie de Sidi Bel Abbes pourétablir la relation entre la carence en fer et l’infection. La population cible est composée de 827 enfants. Les enfants ont bénéficié d’un bilan sanguin comportant l’hémogramme, la ferritinemie, le fer sérique et les immunoglobulines (IgG, IgA, IgM), aussi le lien entre le fer, l’infection et la production de siderophores n’a pas été négligé. Après réalisation des analyses hématologiques, il s’est avéré que 50,5% sont anémique (Hb <11g/dl), alors que le reste soit 49,5%représente les enfants non anémiques (Hb≥11g/dl). Les résultats que nous avons tirés à partir de cette étude montrent que les taux de différents paramètres hématologiques et biochimiques (fer sérique, ferritine, Hb, VGM, HT, CCMH, TCMH) présentent une différence significative entre les deux groupes (témoin et d’étude). (p<0.05) Quant aux cellules immunitaires, nous avons relevé que le taux des neutrophiles est plus bas chez les enfants anémiques par rapport aux enfants non anémiques (p<0.0001). Le taux des lymphocytes est de (71.09±5.02) Chez les enfants anémiques et il est de (58.74±8.40) chez les enfants non anémiques (P<0.001) En ce qui concerne l’immunité humorale, les résultats montrent que les taux des IgG, IgM et IgA présentent une différence significative entre les deux groupes (témoin et d’étude), (p<0.0001). Une forte corrélation positive est notée entre le taux de l’hémoglobine, l’hématocrite, le VGM, TCMH, CCMH et la ferritine, le fer sérique et les IgG est respectivement (r=0.67, r=0.62, r=0.43, r=0.44,r=0.30, r= 0.48, r=0.63).Mais pratiquement aucune corrélation n’est notée entre le taux de l’hémoglobine et l’âge (r = - 0.016). Une sensibilité aux infections a été observée chez les enfants atteints d’anémie par carence martiale. Le résultat de l’enquête épidémiologique a démontré que ces infections ont été causées par différents germes pathogènes dont Pseudomonas. Nous nous sommes intéressés à cette bactérie en termes de sa capacité à synthétiser des siderophores qui sont des chélateurs de fer. Nous avons pu isoler 30 souches du genre Pseudomonas dont on a effectué le dosage des siderophores. Nous avons constaté que la concentration de ces derniers a été significativement supprimé par l’addition d’un bactériostatique qu’on a supposé l’existence dans le sérum de ces enfants malades. Pour conclure, nous pensons que l’immunité humorale et cellulaire est affectée par la carence en fer et que la séquestration des siderophores par le siderocalin représente une attaque directe sur un mécanisme important d’acquisition du fer. Mots-clés Carence – immunité – infection – siderophores – siderocalin.
Isolement et caractérisation des souches productrices de lipase.
(2015-12-01) LARBI DAOUADJI Kelthoum; Encadreur: ABBOUNI Bouziane
Résumé (Français et/ou Anglais) : La demande en thermo-enzymes pour des applications biotechnologiques est de forte croissance. Les lipases sont, parmi les enzymes thermophiles, les plus recherchées dans divers secteurs industriels. Les objectifs de ce travail étaient l’isolement et l’identification des souches thermophiles productrices de la lipase à partir des sources thermales de différentes wilayas d’Algérie, L’optimisation des conditions impliquées dans la production de la lipase par ces souches, leur purification et l’étude des propriétés catalytique de la lipase sont mise en évidence. Le criblage primaire des souches productrices de la lipase sur milieu minimal contenant une concentration de 1% de l’huile d’olive et de tween 80 comme seul source de carbonea permis l’isolement de 59 souches bactériennes thermophiles aérobies. Le criblage secondaire a permis la sélection de 5 souches productrices de la lipase très performantes. L’utilisation des galeries API (20E, 20NE) et l’interprétation probalistique des résultats obtenus a permis l’identification des souches sélectionnées comme étant : GH5 : Geobacillus, S5 : Bacillus subtilis, HB5 : Pseudomonas fluorescens, WO4 : Bacillus licheniformis, HR2 : Bacillus cereus. Différents paramètres impliqués dans la production de lipase et la biomasse tels que la température, la source de carbone et d’azote, la durée d’incubation, la concentration de l’inoculum, la valeur de pH ont été optimisés. Les résultats obtenus ont montré que l’inoculation des souches sélectionnés (WO4, GH5, HB5, HR2, S5) sur milieu de culture minimal, incubées à une température de 50°C pendant un temps d’incubation 72 heures a donné une production maximale (35000, 33000, 2 9000, 26000, 24000µmol/ml/min). La purification partielle de la lipase chez les souches sélectionnées productrices a été effectuée en étapes successives : Dans un premier temps, les protéines sont fractionnées par précipitation au sulfate d’ammonium, ensuite dialysées dans une solution tampon de phosphate de potassium pendant une heure. Dans un second temps, la fraction protéique active est ensuite soumise à une purification partielle sur chromatographie d’échange d’anion (DEAE de cellulose). L’activité enzymatique des lipases produites chez les cinq souches sélectionnées est maximale à des valeurs de pH comprise entre 7-10 et une température de 50-70°C. La purification de la lipase produite chez les souches (S5, HR2, HB5, GH5, WO4) par précipitation au sulfate d’ammonium (40% et 60%) et la chromatographie sur colonne de DEAE-cellulose, a donné les rendements respectifs (19,4, 19,38, 18,1, 17,4, 19,4 %). L’activité enzymatique de la lipase se manifeste stable à des valeurs de pH comprise entre 5-10 et à des températures situées entre 60-90°C pendant un intervalle de temps d’une heure. Par ailleurs, L’activité enzymatique de la lipase est fortement stimulée en présence des ions de Ca+2 et Mg+2 à une concentration de 1mM. Cependant, la présence de certains métaux tels que le Cu+2, Zn+2 et Mn+2 à une concentration de 1mM a manifesté un effet d’inhibition. Mots clés :lipase, criblage, thermophiles, optimisation, caractérisation, stabilité, cinétique de croissance.
Determination des principes nutritionnels et fonctionnels de la pulpe du fruit du jujubier . etude de son potentiel antioxydant et antiinflammatoire
(2016-05-19) Mansour insaf fatima zohra; Encadreur: BENALI Mohammed
Résumé (Français et/ou Anglais) : L’objectif de ce travail consiste à évaluer les principes nutritionnels conventionnels de la pulpe du fruit du jujubier (PFJ) écotype "Zfisef" produit dans l’ouest algérien et à déterminer les composés du métabolisme secondaire ainsi que l’activité antioxydante. Cette dernière ainsi que le potentiel anti-inflammatoire sont mis en évidence in vivo. La PFJ montre un taux d’humidité de 19%, un taux de cendre de 6.1%, un taux de protéines de 2,88 %, une teneur en lipides, en sucres totaux et en vitamine C sont respectivement de 0.28%, 23,20% et 0,194%. Les composés du métabolisme secondaires révèlent un taux de polyphénols totaux important au niveau de l’extrait ethanolique de Ziziphus (EEZ) de la PFJ (7.80 ±0.40 mg EAG /g). Les flavonoïdes représentent 25.58±16.6 mg EQ/gr. Quant la fraction des tanins condensés, elle semble plus importante comparée à celle hydrolysable (P<0,05). Le taux d’anthocyanes de la PFJ est de 4,81±0,44 mg équivalent cyanidine 3-glucoside pour 100 g de PFJ tandis que le béta carotène représente 5,02±0,19 mg pour 100g. Le pourcentage d’inhibition par le DPPH est de 56,60±3,99% à la concentration de l’EEZ de PFJ de 0,25±0,062 mg/ml. Le pouvoir réducteur de l'EEZ et celui de l'acide ascorbique sont déterminé par la méthode FRAP et exprimés en densité optique. Il est de 0,533 ± 0,035 et 1,16 ± 0,020 DO à la concentration de 0,1 mg/ml et 1,87 ± 0,044 et 3,22 ± 0,044 à la concentration de 0,5 mg/ml respectivement pour l’EEZ et l’acide ascorbique. Les composés phénoliques identifiés dans la PFJ par LC- MS/MS sont variés et nombreux en comparaison avec ceux des espèces étrangères. L’effet de l’EEZ sur le taux de survie de Saccharomyces cerevisiea a montré qu’à la concentration de 176 mM de peroxyde d’hydrogène sans l’extrait de PFJ la somme des colonies est estimée à 221UFC/ml soit une diminution de 50% correspondant à la DL 50 alors qu’elle atteint le chiffre de 344 (≈78%) soit une augmentation de 28% par rapport au nombre de colonies à la DL50. Notre EEZ a un effet palliatif par son potentiel antioxydant appréciable face à l’effet létal du peroxyde d’hydrogène. L’étude in vivo de l’induction d’œdème par injection de carragénine chez le rat Wistar démontre l’effet anti-œdémateux de l’EEZ comparé au Diclofénac. Dans les mêmes conditions expérimentales, la détermination immunoturbidimétrique du CRPr et l’étude de la formule leucocytaire confirment l’effet anti- inflammatoire de ce fruit. Abstract : The objective of this work is to assess the conventional nutritional principles of the pulp of the fruit of the jujube (PFJ) ecotype "Zfisef" product in western Algeria and identify compounds of secondary metabolism and antioxidant activity. The latter and the anti- inflammatory potential are demonstrated in vivo. The PFJ shows a humidity of 19%, an ash content of 6.1%, a protein content of 2.88%, a lipid content, total sugars and vitamin C are 0.28%, 23, 20% and 0.194% respectively. Secondary metabolism of compounds show a significant rate of total polyphenols in the ethanolic extract of Zizyphus (EEZ) of the PFJ (7.80 ± 0.40 mg EAG / g). Flavonoids are 25.58 ± 16.6 mg EQ/gr. As the fraction of the condensed tannins seems more important compared to that hydrolyzable (P <0.05). The anthocyanin content of the PFJ is 4.81 ± 0.44 mg equivalent cyanidin 3-glucoside per 100 g of PFJ while the beta carotene is 5.02 ± 0.19 mg per 100g. The percent inhibition by DPPH is 56.60 ± 3.99% at the concentration of EEZ PFJ 0.25 ± 0.062 mg/ml. The reducing power of the EEZ and the ascorbic acid are determined by the FRAP method and expressed as optical density. It is of 0.533 ± 0.035 and 1.16 ± 0.020 OD at a concentration of 0.1 mg/ml and 1.87 ± 0.044 and 3.22 ± 0.044 at the concentration of 0.5 mg/ml respectively for the EEZ and ascorbic acid. Phenolic compounds identified in the PFJ by LC-MS/MS are varied and numerous in comparison with those of the foreign species. The effect of EEZ on Saccharomyces cerevisiea survival rate shows that at the concentration of 176 mM hydrogen peroxide, without the extract PFJ, the sum of colonies is estimated 221UFC/ml with 50% reduction corresponding to the LD50, whereas it is 344 CFU/ml (≈78%) a 28% increase relative to the number of colonies to the LD50. Our EEZ has a palliative effect by its appreciable antioxidant potential against the lethal effect of hydrogen peroxide. The in vivo study of the induction of edema by carrageenan injection in Wistar rats demonstrates the anti- edematous effect of EEZ compared to Diclofenac. In the same experimental conditions, the determination of Immunoturbidimetric CRPr and the study of leukocyte count confirms the anti-inflammatory effect of this fruit.
Evaluation de l’infertilité masculine dans l’ouest algérien : étude épidémiologique et biologique.
(2016-06-01) FIZAZI Anissa; Encadreur: BENDAHMANE Malika
الملخص(بالعربية): مقدمة: حوالي 15٪ من الأزواج حول العالم يعانون من مشاكل في الإنجاب، في 40 إلى 60٪ من الحالات الرجل هو المسؤول الوحيد عن العقم الهدف: الهدف من هذه الدراسة هو تقييم العقم عند الذكور في الغرب الجزائري لتحديد اضطراب الحيوانات المنوية الرئيسي وكذا مختلف الأسباب وعوامل الخطر المتعلقة بهذه المشكلة الصحية الخطيرة المرضى والمنهجية: أجرينا دراستنا على 320 مريض يعانون من اضطرابات الخصوبة بالمستشفى الجامعي 1 نوفمبر 1954 بوهران خلال الفترة الممتدة من يناير إلى ديسمبر 2014. لجمع البيانات، استخدمنا استبيان للحصول على المعلومات اللازمة بشأن البيانات الاجتماعية والديموغرافية للمرضى، ونمط الحياة والتاريخ الطبي والإنجابي.تقييم خصوبة الرجال يعتمد بالضرورة على الفحص البيولوجي للحيوانات المنوية. وهكذا تم إجراء تحليل السائل المنوي لجميع المرضى النتائج: نتائج هده الدراسة تبين أن متوسط عمر المرضى يقدر ب40.39 ± 7.59 سنوات ومتوسط مدة العقم 5.20 ± 3.79 سنة. فيما يتعلق بأسباب العقم فقد تبين أنه في 29٪ من الحالات السبب مجهول، أما دوالي الخصية فهي السبب في 24٪ من حالات العقم والعدوى في 22٪ من الحالات كما كشفت هذه الدراسة العديد من عوامل الخطر المتعلقة بالعقم مثل السن المتقدم للمرضى الذي تجاوز 35 عاما في 73٪ من الحالات، والتدخين (70٪)، الوزن الزائد(62٪) و التعرض المهني للحرارة (35.5٪).وقد كشفت نتائج تحاليل السائل المنوي أن الاضطراب الرئيسي للحيوانات المنوية تمثل في نقص الحركة الخلاصة: توعية الرجال المصابين بالعقم عن عوامل الخطر ضرورية لزيادة الخصوبة الطبيعية قبل العلاج. هناك حاجة إلى إجراء مزيد من الدراسات المعمقة حول العقم مجهول السبب. Résumé (Français et/ou Anglais) : Introduction : Environ 15 % des couples consultent pour des difficultés à procréer. Dans 40-60% des cas, l’homme est seul responsable de cette infertilité. Objectif : Le but de la présente étude est d’évaluer l’infertilité masculine dans l’ouest Algérien afin de déterminer les principales perturbations spermatiques, les différentes étiologies et facteurs de risque à l’origine de ce problème majeur de santé publique. Patients et méthodes : Nous avons mené une étude descriptive transversale sur 320 patients consultant pour des troubles de la fertilité au niveau de l’unité d’Assistance Médicale à la Procréation (AMP) de l’établissement hospitalo-universitaire EHU 1er Novembre 1954 d’Oran durant une année, allant de janvier à décembre 2014. Pour le recueil des données, nous avons utilisé un questionnaire structuré pour obtenir les informations nécessaires concernant les données socio-démographiques des patients, leur mode de vie et leur historique médical et reproductif. L’évaluation de la fertilité masculine implique nécessairement l’examen biologique du sperme. De ce fait un examen du sperme a été réalisé à tous les patients. Résultats : L’âge moyen des patientes était de 40,39± 7,59 ans, l’infertilité était de type primaire dans 82% des cas et la durée moyenne d’infertilité était de 5,20± 3,79 ans. Concernant les différentes étiologies on a constaté que dans 29% des cas l’infertilité était d’origine idiopathique, elle était due à la varicocéle dans 24% des cas et aux infections dans 22% des cas. Cette étude a aussi révélé de nombreux facteurs de risque de l’infertilité tel que l’âge avancé des patients qui était supérieur à 35 ans dans 73% des cas, le tabagisme (70%), le surpoids (62%) et l’exposition professionnelle à la chaleur (35,5%). Les résultats des spermogrammes ont révélé que la principale perturbation spermatique était l’asthénospermies (85%). Conclusion : La sensibilisation des hommes infertiles sur les facteurs de risque d’infertilité est recommandée afin d’augmenter la fertilité naturelle et de permettre une meilleure prise en charge de l’infertilité masculine avant tout traitement. Une investigation plus approfondie s'avère nécessaire devant l'élévation du taux d'infertilité d'origine idiopathique.
Statue en vitamine D et en calcium chez les femmes enceintes et leurs nouveaux nés. Intérêt du dosage de la vitamine D par electrochimiluminescence (ECLIA)
(2016-06-01) Benali amina iméne; Encadreur: Demmouche Abbassia
ملخص فيتامين (د) هو عنصر أساسي لصحة الإنسان وينتج اساسا في الجلد استجابة لأشعة الشمس. نقص فيتامين (د) هو أمر شائع لدى النساء الحوامل والأطفال حديثي الولادة. في الجزائر، ودراسات عن حالة من فيتامين (د) أثناء الحمل هي متباينة المواد والطرق: وتشمل دراسة استطلاعية أول عينة من النساء الحوامل (ن = 900) ومواليدهن. لتحديد مدى انتشار نقص كلس الدم خلال فترة الحمل وتأثيره على وزن المولود. وقد أجريت الدراسة الثانية في 100 زوج الأم حديثي الولادة في فصل الشتاء لتقييم تحليلات الوضع فيتامين د والتي تركز على المصل 25-هيدروكسي فيتامين (د) (25 OH د) وهرمون الغدة الدرقية (PTH) من الكالسيوم والألبومين والفوسفاتيز القلوية (ALP) قياس عند الولادة (الأم والشرايين دم الحبل السري) النتائج: انتشار نقص كلس الدم لدى النساء الحوامل 70.55٪. كانت 53،71٪ من الأطفال حديثي الولادة وزنها أقل من 2500 غ نقص كلس الدم. 79.09٪ من الحالات المبكرة لديهم نقص كلس الدم. وهكذا، يمكن أن نقص كلس الدم أن يكون أحد عوامل الخطر لبعض الظروف التوليد مثل سكري الحمل، وارتفاع ضغط الدم (الحمل الناجم عن والمزمنة) والخداج. انتشار نقص فيتامين (د) (معدل 25OHD3 <30ng / مل) في مجتمع الدراسة هو 100٪. لدينا جميع السكان (الأم / الشرياني الحبل الدم) لديه حاد نقص فيتامين (د) 86٪ من الأمهات و 78٪ من الأطفال حديثي الولادة لديهم مستويات 25 (OH) D <3 نانوغرام / مل. متوسط مستوى PTH الأمهات 92.13 ± 45.29 بمول / لتر، ودم الحبل السري هو 13.61 ± 11.82 بمول / لتر (P <0.05). تناول الكالسيوم منخفض بين النساء (796.30 ± 366.35 ملغ كا / د). والأمهات متوسط معدل الكالسيوم في الدم 84.64 ± 4.04 ملغم / لتر، وكان دم الحبل السري 96.26 ± 9.90 ملغ / لتر (<0.05). ويرتبط الكالسيوم مصل الأم مع الكالسيوم من دم الحبل السري (ص = 0.16؛ ف = 0.69). متوسط مستوى الزلال الأمهات 30.84 ± 3.26 جم / لتر. وسلبا وبشكل كبير المترابطة PTH مع الكالسيوم (ص = -0.22؛ P = 0.01). 25 (OH) D يرتبط ارتباطا إيجابيا مع الأم و25 (OH) D من دم الحبل السري (ص = 0.78، P <0.01) وسلبا وبشكل كبير مع PTH (ص = -0.24؛ P (<0.001). تم العثور على علاقة خطية سالبة بين الحمول والكالسيوم الأمهات (ص = - 0.32، ع = 0.02) الخلاصة: هناك ارتفاع معدل انتشار شديد نقص فيتامين (د) لدى النساء والأطفال حديثي الولادة الحوامل في سيدي بلعباس، الجزائر. وينبغي دعم سياسة التغذية تشجيع تناول الكالسيوم وهناك حاجة إلى فيتامين د لتحسين صحة الأمهات والأطفال حديثي الولادة الكلمات الرئيسية: فيتامين (د) والكالسيوم، والحمل، حديثي الولادة، والحبل السري، ونقص، سيدي بلعباس ----------------------------------------------------------------------------------- RESUMÉ La vitamine D est une composante essentielle de la santé humaine et est principalement produite dans la peau sous l’effet de la lumière solaire. La carence en vitamine D est fréquente chez les femmes enceintes et les nouveau-nés. En Algérie, les études sur le statut de la vitamine D pendant la grossesse sont disparates. Matériels et méthodes : une première étude prospective portait sur un échantillon de femmes enceintes (n=900) et leurs nouveau-nés. Afin de déterminer la prévalence de l’hypocalcémie pendant la grossesse et ses conséquences sur le poids du nouveau-né. Une deuxième étude est réalisée chez 100 couples mère-nouveau-nés en hiver, afin d’évaluer leur statut vitaminique D. Les analyses ont porté sur les concentrations sériques de 25 hydroxy-vitamine D (25 OH D), de parathormone (PTH), de calcémie, d'albumine et de phosphatase alcaline (ALP) mesurées à l’accouchement (mère et sang artériel du cordon) Résultats: La prévalence de l'hypocalcémie chez les femmes enceintes est de 70,55%. 53,71% des nouveau-nés d’un poids inférieur à 2500 g ont une hypocalcémie. 79,09% des cas prématurés présentent une hypocalcémie. Ainsi, l’hypocalcémie pourraitêtreun facteurderisquedecertainespathologiesobstétricales tel que le diabète gestationnel, l’hypertension artérielle (gravidique et chronique) et la prématurité. La prévalence de l’hypovitaminose D (taux de 25OHD3 < 30ng/ml) dans la population étudiée est de 100%. Toute notre population (mère/ sang artériel du cordon) présenteunecarence sévèreenvitamineD. 86% des mères et 78% des nouveau-nés ont des taux de 25 (OH) D <3 ng/ml. Le niveau moyen de la PTH maternelle est de 92,13 ± 45,29 pmol/L, et celui du sang du cordon est de 13,61 ± 11,82 pmol/L (p<0.05). L'apport de calcium est faible chez les femmes (796,30 ± 366,35 mg Ca/j). Le taux moyen de calcium sérique maternel est de 84,64 ± 4,04 mg/L, et celui du sang du cordon était 96,26 ± 9,90 mg/L (<0.05). La calcémie maternelle est corrélée avec le calcium du sang du cordon ombilical (r = 0,16 ; p = 0,69). Le niveau moyen de l’albumine maternelle est de 30,84 ± 3,26 g/l. La PTH est négativement et significativement corrélée avec le calcium (r = -0,22 ; P = 0,01). La 25 (OH) D maternelle est corrélée positivement avec et le 25 (OH) D du sang du cordon (r = 0,78, P <0,01) et négativement et significativement avec la PTH(r = -0,24 ; P <0,001). Une relation linéaire négative a été trouvée entre gestité et calcium maternelle (r = - 0,32 ; p = 0,02). Conclusion :Il y a une forte prévalence sévère de la carence en vitamine D chez les femmes enceintes et les nouveau-nés à Sidi Bel-Abbes, en Algérie. Une politique nutritionnelle encourageant les apports calciques alimentaires devrait être soutenue et une supplémentation en vitamine D est nécessaire pour améliorer la santé maternelle et néonatale. Mots- clés : vitamine D, calcium, grossesse, nouveau-né, cordon ombilical, carence, Sidi Bel Abbes
LES FACTEURS DE RISQUES DU FAIBLE POIDS DE NAISSANCE DANS L’OUEST DE L'ALGERE (RELIZANE ET SIDI BEL ABBES )
(2016-06-02) Ghani abdelaziz; Encadreur: Demmouche Abbassia
Résumé (Français et/ou Anglais) : Le faible poids de naissance constitue un problème majeur de santé publique, aussi bien dans les pays développés que dans les pays en développement, par son ampleur et sa forte association avec la morbidité et la mortalité infantile. L’objectif de cette étude était d’identifier les facteurs de risques, maternels et fœtaux associés au petit poids de naissance dans la région ouest de l’Algérie Sidi Bel Abbes et Relizane. Deux études épidémiologique ont étés conduites durant notre période de travail ou nous avons colligés au global 2548 nouveau-nés, soit un taux de faible poids de naissance de 7,01% avec un poids moyen de 3386.95±56 (g) a Sidi Bel Abbes et de 6, 51 % avec un poids de 3366.34 ±50 (g) a Relizane. Le traitement et l’analyse des données statistiques ont été effectués grâce aux logiciels STAT VIEW et SPSS. Le seuil de signification p<0,05 et le coefficient de corrélation R ont été retenus pour les analyses. Une relation statistiquement significative entre le poids de la mère prégravidique et le poids moyen du nouveau-né (P=0.0007) a été noté. Nos résultats révèlent une corrélation statistiquement significative entre la mortalité des nouveau nés et leur poids de naissance (P=<0.0001). Une forte corrélation entre le poids du nouveau-né et quelques paramètres notamment (âge de la grossesse R=0.28, hauteur utérine R=0.25 les grossesses multiple R=0.60). Il existe une relation statistiquement significative entre l’IMC et le poids de naissance (P=0.001). Le tabac a été trouvé significativement associé au faible poids de naissance (p=0.001). Nos résultats générales montrent que les problèmes éprouvés par la mère durant la grossesse tels que le stress, les pathologies (HTA), l’exposition aux facteurs environnementaux et suivre certains comportements malsains durant la grossesse tel que l’exposition au tabac, pollution d’aire consommation des boissons, fréquentation de hammam l’utilisation des contraceptives et un faible indice de masse corporel avec P hautement significatif < 0.001 sont les principaux facteurs qui influencent négativement la santé de l'enfant. Toutefois, une étude complémentaire prospective dans la population générale serait nécessaire afin d'étudier d'autres facteurs et de mieux étudier les mécanismes par lesquels les différents facteurs s'enchaînent. Mots clés : Poids de naissance - Facteurs de risque – Grossesse - Sidi Bel Abbes - Relizane
Facteurs de risque de l’infertilité féminine dans l’ouest de l’Algérie (Région d’Oran et Sidi Bel Abbes)
(2016-06-02) MAÏ Abdessalem Hichem; Encadreur: DEMMOUCHE Abbassia
Résumé (Français et/ou Anglais) : Introduction : Selon l'organisation mondiale de la santél’infertilité féminine est un problème croissant dans pratiquement toutes les cultures et sociétés. Partout à travers le monde, le nombre de couples infertiles est estimé à 48,5 millions, l'infertilité est donc un problème de santé mondial qui doit être abordé, en particulier dans les pays en voie de développement où les taux d'infertilité sont plus élevés. L’objectif de cette recherche est d'étudier les différentes causes et facteurs de risque de l'infertilité chez les femmes en âge de procréer dans deux régions différentes d’Algérie (Oran et Sidi Bel Abbes), afin de récolter plus d'informations sur le problème d'infertilité en Algérie. Méthodes : Nous avons réalisé une étude de type transversal descriptif s’intéressant aux facteurs de l’infertilité de façon générale dans la région d’Oran et Sidi Bel Abbes. Nous avons ensuite entamé une 2éme étude du même type qui s’est particulièrement penchée sur les facteurs de risque de l’infertilité secondaire. Deux études rétrospectives ont été réalisées afin d’analyser l’impact des fibromes utérins et infections génitales sur la fertilité des femmes atteintes de ces pathologies. Une étude Cas-Témoin a été faite afin d’évaluer l’association de l’indice de masse corporelle avec la fertilité féminine. Enfin une étude observationnelle a été effectuée dans le but de déterminer le profil hormonal des femmes souffrant d’infertilité. Résultats : Les résultats de la 1ère étude ont montré que les causes d’infertilité les plus fréquentes sont les infections génitales (13.49%), les problèmes dans les trompes de Fallope (12.69%) et le déficit ovarien (9.52%), un grand pourcentage de patientes avaient une infertilité d’origine inexpliquée (30.95%). La deuxième étudea indiqué que (34.3%) des femmes souffrant d’infertilité secondaire avaient déjà eu un avortement et la cause d’infertilité la plus représentée était l’infection génitale (16.3%). L’étude des fibromes nous a permis de constater que ce sont les fibromes sous-muqueux (Odd Ratio=1.36) et intra-muros (Odd Ratio=3.02) qui sont les plus associés à l’infertilité, alors que l’infection génitale la plus fréquente chez les patientes infertiles était Chalamydia Trachomatis (47.5%). L’étude portant sur les indices de masse corporelle chez les femmes fertiles et infertiles a montré que les patientes obèses et en surpoids avaient 2 à 3 fois plus de risque de souffrir de l’infertilité (Odd Ratio =2.23 et 3.26). Finalement l’analyse des profils hormonaux a indiqué que les problèmes chez les femmes infertiles se trouvaient principalement au niveau de la prolactine (17.5%), de l’hormone lutéinisante (25.1%) et de l’hormone folliculostimulante (25 %). Conclusion : Cette étude offre un premier aperçu des différents facteurs de risque de l'infertilité féminine à Sidi Bel Abbes et à Oran. Les résultats retrouvés concordent avec ceux de la littérature, mais d’autres recherches sont nécessaires pour évaluer de façon plus précise chacun des facteurs étudiés et inclure d’autres paramètres qui n’ont pas été abordés dans cette thèse. Mot clés : Infertilité féminine- Facteurs de risque -Sidi Bel Abbes-Oran Résumé (Français et/ou Anglais) : Introduction: According to the World Health organization infertility is a growing health problem in virtually all cultures and societies around the world and the number of infertile couples is estimated to be 48.5 million worldwide, showing that infertility is a global health problem that must be addressed, especially in developing countries where infertility rate are shown to be higher.The goal of this research was to study the various causes and risk factors of infertility in women of reproductive age in two different regions of Algeria (Oran and Sidi Bel Abbes), in order to have more information on the infertility problem in Algeria. Methods: We performed a descriptive, cross-sectional study focusing on the factors of infertility in the region of Oran and Sidi Bel Abbes, we then did a second similar study that was particularly focused on the risk factors of secondary infertility. Two retrospective studies were carried out to analyze the impact of uterine fibroids and genital infection on fertility of women. A Case-Control study was made to assess the association of body mass index with female fertility. Finally an observational study was conducted to determine the hormonal profile of women suffering from infertility. Results: The results of the first study showed that the most common causes of infertility are genital infections (13.49%), problems in the fallopian tubes (12.69%) and ovarian failure (9.52%), a large percentage of patients had unexplained infertility (30.95%). The second study indicated that (34.3%) of women with secondary infertility had already had an abortion and the most found cause of infertility was genital infection (16.3%). The study of fibroids allowed us to see that it is the submucosal fibroids (Odd Ration = 1.36) and intramural (Odd Ratio = 3.02) that are most associated with infertility, while the genital infection most common in infertile patients was Chalamydia trachomatis (47.5%). The study of body mass index in fertile and infertile women showed that overweight and obese patients were 2-3 times more likely to suffer from infertility (Odd Ratio = 2.23 and 3.26). Finally the analysis of hormonal profiles indicated that problems in infertile women were mainly found in prolactin (17.5%), luteinizing hormone (25.1%) and follicle stimulating hormone (25%). Conclusion: This study provides the first glimpse at the different risk factors of female infertility in Oran and Sidi Bel Abbes. results are in accordance with those of the literature, but more research are needed to assess more accurately each factors studied and include other parameters that have not been addressed in this thesis. Key words: Female Infertility- Risks factors -Sidi Bel Abbes-Oran
Etude des critères zootechniques de gestion de reproduction bovine au niveau d'élevages bovins laitiers dans l'Ouest de l'Algérie et l'élaboration d'un guide technique de reproduction
(2016-12-15) ACHEMAOUI AMINE; Encadreur: BENDAHMANE Malika
Résumé: La maitrise de la reproduction, c’est la maitrise de l’avenir en termes de retombée économique. L'objectif principal de notre étude est d’évaluer la situation des exploitations au cours de la période 2013-2016 des bovins laitiers dans la région de l'Ouest de l'Algérie et d'établir un diagnostic des conditions d'élevage dans la région. L'objectif secondaire est d'analyser les résultats de reproduction, de la production laitière et de l'état de santé d’élevages suivis tout en appréciant l’influence de différents facteurs de risques sur les paramètres de reproduction (date de vêlage, élevage, rang de vêlage, production laitière, pathologies "mammite, boiterie"). Enfin, en se basant sur les données de ce diagnostic, des recommandations seront proposées pour l’amélioration des performances de l’élevage bovin laitier au niveau de cette région sous forme d'un guide destiné aux éleveurs. Les résultats obtenus montrent que les conditions d’élevage à travers les 4 wilayas rencontrent de nombreuses contraintes liées à l’alimentation des animaux, à leur faible potentiel génétique( 12% race locale), à la difficulté de l’accès au foncier et à la main d’œuvre (74% familiales)et dans une moindre mesure, viennent le coût du traitement sanitaire et l’inadéquation de l’habitat des animaux. Les performances d'élevage suivi sont en dessous des objectifs techniques et économiques visées (IVV (444 jours), TRIA (49.24%). Les observations faites au sujet de la production laitière et l’état d’embonpoint démontrent que les moyens utilisés sont plus au moins acceptables par rapport aux normes admises. Ainsi, l’évaluation de l'état de locomotion indique une situation plus au moins alarmante (55%). Enfin, l'évaluation de l'état de santé des bovins, en l’occurrence les mammites se fait par la technique CMT (31%), un test de dépistage d'une très grande fiabilité (89,1%) et moindre coût. Il pourrait être ainsi utilisé comme une solution alternative au comptage des cellules somatiques du lait dont le coût est exorbitant et permet d'envisager son utilisation à la ferme pour identifier les vaches atteintes de mammites puisqu'il est à la portée de tous les éleveurs y compris ceux ayant une faible technicité. Mots-clés : Elevage, bovins laitiers, reproduction, mammite, boiterie, Test CMT.
ISOLEMENT ET CARACTERISATION DE BACTERIES PRODUCTRICES DE CELLULASE
(2017-02-21) REFFAS Fatma-Zohra Imène; Encadreur: ABBOUNI Bouziane
Résumé (Français et/ou Anglais) : Les enzymes produites par les microorganismes présentent une importance particulière dans l’industrie biotechnologique, les cellulases, enzymes classées selon la nomenclature internationale EC 3.2.1.4 , largement utilisées dans l’industrie de biotransformation (agroalimentaire, biodégradation des déchets , production de biocarburants). L’objectif de ce travail est l’isolement et caractérisation de bactéries productrices de cellulases, l’étude de la cinétique enzymatique, l’optimisation des paramètres physicochimiques impliqués dans la production des cellulases les sources de carbone, les sources d’azote, les sources d’ions, pH et la température. L’isolement des bactéries productrices de la cellulase est effectué à partir d’échantillons prélevés du sol, les écorces d’oliviers et racines de pois chiche et fumier de vache par l'utilisation d'un milieu de culture, contenant la cellulose comme seule source de carbone (Cellulose medium Salt). Le criblage primaire des souches bactériennes productrices de la cellulase est mis en évidence par inondation de la surface de la gélose du milieu de culture utilisé, contenant des colonies pures, avec une solution de 1% de rouge de congo. Les colonies isolées, sélectionnées productrices de la cellulase par la mesure de la zone d'hydrolyse formée sur la surface du milieu de culture contenant la cellulose comme seule source de carbone sont soumises à une éventuelle identification. Par ailleurs, l'étude du suivi de la cinétique enzymatique et l’optimisation des paramètres physicochimiques impliqués dans la production de la cellulase sont réalisées par l'utilisation de la méthode DNS. Les résultats obtenus ont montré que parmi les 16 souches isolées, 5 souches se manifestent hautement productrices de la cellulase. Par ailleurs, l’étude du suivi de la cinétique enzymatique et l'optimisation des différents paramètres impliqués dans la production de la cellulase chez les 5 souches sélectionnées productrices de la cellulase ont révélé une importante source de production de cette enzyme, qui pourrait être exploitée dans le domaine industriel. Mots clés : bactéries cellulolytiques, cellulase, biomolécules, paramètres physicochimiques.
Isolement et caractérisation des microorganismes à intérêt biotechnologique de la région de Sidi Bel Abbes
(2017-02-28) MEZOUARI SOUMIA; Encadreur: ABBOUNI BOUZIANE
Résumé (Français et/ou Anglais) : Les cyanobactéries constituent un groupe de bactéries capables de produire une multitude de substances antibactériennes, algicides, antifongiques, antivirales. L’objectif de ce travail est l’isolement, la purification et l’identification des cyanobactéries de certains écosystèmes aquatiques de la wilaya de Sidi Bel Abbes. L’activité antagoniste des substances bioactives élaborées par les isolats de cyanobactéries est mise en évidence vis-à-vis de certaines souches pathogènes responsables d’infections nosocomiales par l'utilisation des germes témoins de l'activité antagoniste utilisés. Ce sont des bactéries à gram positif : Staphylococcus aureus ATCC 43300, Enterobacter aerogenes ATCC 35029 et des bactéries à gram négatif : Escherichia coli ATCC 25922, Salmonella typhimurium ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Proteus vulgaris ATCC 6896 et Klebsiella pneumonia ATCC 10031, les levures : Candida albicans ATCC 20408, et champignons filamenteux : Aspergilus niger ATCC 6275, Aspergilus flavus ATCC 10124. A cet effet, quatre solvants organiques sont utilisés pour l’extraction des agents bioactifs responsables d’activité antagonistes, le méthanol, l’éthanol, l’acétone et l’éther diéthylique. Le screening primaire a permis l'isolement de quatre souches appartenant aux Cyanobactéries, avec l'appartenance de 75% des souches isolées à la famille des Oscillatoriaceae. La mise en évidence de l’activité antagoniste des cyanobactéries isolées vis-à-vis des germes témoins responsables d’infections nosocomiales par la méthode de diffusion des puits a révélé que les extraits des cyanobactéries ont manifesté une activité inhibitrice de croissance des souches testées. L'utilisation des extraits méthanoliques, acétoniques d’Oscillatoria sp, l’extrait méthanolique d’A.spherica et lyngbya sp, et l’extrait acétonique de Phormidium sp a manifesté une excellente activité antagoniste vis-à-vis des germes témoins de cette activité. A l'opposé, la souche E.coli a présenté une forte résistance par rapport à la totalité des extraits des cyanobactéries isolées. Par ailleurs, l'étude de l’activité antagoniste des cyanobactéries vis-à-vis des champignons filamenteux : Aspergilus niger ATCC 6275, Aspergilus flavus ATCC 10124 a révélé que les substances extraites à partir des cultures de Lyngbya sp et Phormidium sp à l'aide d’éther diétylique ont manifesté une excellente activité. Par contre, les substances extraites d’Anabeana spherica ont manifesté une faible activité antagoniste vis-à-vis de souches fongiques pathogènes. La caractérisation des pigments photosyntetiques fluorescents qui peuvent être responsables de l’activité antagoniste d’Anabeana spherica, réalisée par la technique HPLC et HPLC-DAD a permis l'identification de 9 composés la chlorophylle, α-caroténe, β-caroténe, la luteine, l’astaxanthine, la violaxanthine, la Zeaxanythine, Neoxanthine et Canthaxanthine. Abstract: Cyanobacteria are a group of bacteria able of producing a variety of antibacterial substances, algaecides, antifungal and antiviral. The aim of this work is isolation, purification and identification of cyanobacteria from some aquatic ecosystems of wilaya of Sidi Bel Abbes, thereafter evaluation of the antagonistic activity of bioactive substance of cyanobacteria against pathogenic strains responsible for nosocomials infections, 10 test strains are used such as Escherichia coli ATCC 25922, Salmonella typhimurium ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Proteus vulgaris ATCC 6896, Klebsiella pneumonia ATCC 10031 and Gram-positive strains such as Staphylococcus aureus ATCC 43300, Enterobacter aerogenes ATCC 35029. The used yeast was Candida albicans ATCC 20408 and the investigated filamentous fungi’s were Aspergilus niger ATCC 6275, Aspergilus flavus ATCC 10124. For this purpose, four organic solvents are used for the extraction of bioactive agentsresponsible for antagonistic activity methanol, ethanol, acetone, diethyl ether, the antagonistic activity of cyanobacteria is evaluated buy the using agar well diffusion method, the obtaine result showed that the extracts of the cyanobacteria showed growth inhibitory activity against the strains tested. The used of methanol and acetone extract of Oscillatoria sp, methanol extract of A.spherica and lyngbya sp, and aceton extractof Phormidium sp yielded the highest antagonistic activity against pathogenic strains. In contrast, E.coli has manifested an important resistance against crude extract of cyanobacteria. For antifungal activity the result revealed that the substances extracted from the cultures of Lyngbya sp and Phormidium sp using diethyl ether showed excellent activity. Furthermore, substances extracted from Anabeana spherica showed low antagonist activity against pathogenic fungal strains. The characterization of bioactive compounds responsible for antibacterial and antifungal activity is assased buy HPLC and HPLC-DAD, the results obtained allowed the identification of 9 compounds: chlorophylle, α-carotene, β-carotene, lutein, astaxanthin, violaxanthin,Zeaxanythin, Neoxanthin and Canthaxanthin.
Evaluation du potentiel nutritionnel et antioxydant de quelques variétés de truffes du sud-ouest algérien. Effets antimicrobien et anti-inflammatoire
(2017-03-14) Boufeldja Wahiba; Encadreur: Benali Mohammed
Résumé (Français et/ou Anglais) : La truffe du désert connue sous le nom vernaculaire «El Terfess», est un champignon rare de bizarrerie de la nature qui appartient à la famille des ascomycota. Il est récolté, consommé et utilisé en ethnomédecine depuis l’antiquité. Cette étude a pour l’objectif de déterminer la teneur en métabolites primaires et secondaires et d’évaluer l’activité antioxydante, antimicrobienne, ainsi que le potentiel anti-inflammatoire des extraits méthanoliques des ascocarpes desséchés de quatre espèces de Truffes récoltées de trois régions différentes du Sud-ouest algérien. Terfezia boudeiri qui provient de Tabelbala-Béchar montre une richesse nutritionnelle avec 13,32±0,14% de protéines, 5,8±0,173% de lipides, 6,25±0,11% de sucres et 7,25±0,55% de minéraux, comparativement aux autres espèces Tirmania nivea et Terfezia claveryi de Chellala, et Terfezia arenaria de Mecheria. L’estimation quantitative des flavonoïdes, des tanins, de la vitamine C, des caroténoïdes et des phénols totaux a montré que les extraits méthanoliques sont riches en ces composés avec des proportions différentes entres les quatre espèces où T.boudieri montre toujours une prépondérance en polyphénols et en tanins avec respectivement 53.62± 0,26 mg EAG/g et 12,42± 0,10 mg EQ/g MS. Pour T. arenaria et T. Claveryi, la première présente la plus forte teneur en flavonoïdes (19,44 ± 0,30 mg EC/g) et la deuxième la plus forte teneur en caroténoïdes (1,83±0.04 mg/ml). Par contre Tin2 montre la richesse absolue en vitamine C par rapport aux autres espèces étudiées. L’évaluation du pouvoir antioxydant par le test DPPH et celui de FRAP a indiqué que l’extrait de T. boudeiri présente une activité antioxydante de 90% à la concentration de 1 mg/ml contrairement aux autres espèces qui montrent une activité modérée entre 42,06 et 77,82% à la même concentration. Les résultats de l’activité antimicrobienne des extraits méthanoliques des truffes sur douze souches bactériennes et deux souches de levures mettent en évidence une forte inhibition surtout contre les bactéries Gram+ avec un diamètre qui varie de 10,33±0,34 à 30±0,2 mm. En revanche ils ont une activité modérée vis-à-vis les bactéries Gram- et aucun effet sur les levures. L’évaluation de l’activité anti-inflammatoire in vivo des extraits de T. boudieri et T. arenaria montrent une inhibition de l’œdème de la patte induit par la carragénine chez les rats Wistar avec un taux moyen de 80 %.De plus une augmentation légère de la CRPr et une diminution du taux de l’albumine sérique par rapport à l’état initial, ainsi une diminution remarquable des leucocytes, des hématies et des plaquettes par rapport au lot traité avec du Nacl 0,9%.La différence entre ces valeurs et les valeurs obtenus par l’anti-inflammatoire de référence est statistiquement non significative. En définitive, les truffes peuvent être recommandées pour leurs vertus nutritionnelles et thérapeutiques importants. Mots clés : truffes, Tirmania, Terfezia, principes nutritionnels, activité antioxydante, activité antimicrobienne, activité anti-inflammatoire. The desert truffle known as the vernacular “El Terfess” is a rare fungus of oddity of nature that belongs to the family of ascomycota. It was harvested, consumed and used in ethnomedicine since antiquity. The purpose of this study was to determine the content of primary and secondary metabolites and to evaluate the antioxidant, antimicrobial activity and the anti-inflammatory potential of methanol extracts of dried ascocarps from four Truffle species harvested from three Regions of south-western Algeria. Terfezia boudeiri from Tabelbala Béchar showed a nutritional richness with 13.32 ± 0.14% of proteins, 5.8 ± 0.173% of lipids, 6.25 ± 0.11% of sugars and 7.25 ± 0.55 % of minerals, compared to other species Tirmania nivea and Terfezia claveryi from Chelala, and Terfezia arenaria from Mecheria. The quantitative estimation of flavonoids, tannins, vitamin C, carotenoids and total phenols showed that the methanolic extracts were rich in these compounds with different proportions between the four species where T. boudieri always showed a preponderance polyphenols and tannins with 53.62 ± 0.26 mg EAG / g and 12.42 ± 0.10 mg EQ / g respectively. For T. arenaria and T. Claveryi, the first have the highest level of flavonoids (19.44 ± 0.30 mg EC / g) and the second the highest level in carotenoids (1.83 ± 0.04 mg / ml). Evaluation of antioxidant potency by the DPPH and FRAP tests indicated that the T. boudeiri extract had an antioxidant activity of 90% at the concentration of 1 mg/ml, unlike the other species which showed moderate activity between 42,06 and 77,82% at the same concentration. The results of the antimicrobial activity of methanol extracts of truffles on twelve bacterial strains and two strains of yeasts showed a strong inhibition especially against Gram+ bacteria with a diameter which varies from 10,33±0,34 to 30±0,2 mm. On the other hand, they have a moderate activity with respect to the other bacteria and no effect on the yeasts. Evaluation of the in vivo anti-inflammatory activity of the extracts of T. boudieri and T. arenaria showed an inhibition of carrageenan-induced paw edema in Wistar rats with an average rate of 80%. Of more a light increase of the CRPr and a decrease of the rate of the serum albumin compared with the initial state, so a remarkable decrease of the leukocytes, the red blood corpuscles and the plaques compared with lot treated with the Nacl 0,9 %. The difference between these values and the values obtained by the reference anti-inflammatory agent is statistically insignificant. Ultimately, truffles can be recommended for their nutritional and undeniable therapeutic benefits. Key words: truffles, Tirmania, Terfezia, nutritional principles, antioxidant activity. Antimicrobial activity, anti-inflammatory activi
Etude de l’hétérogénéité moléculaire des cancers du sein dans la région du nord-ouest de l’Algérie et identification de RAB25 comme cible thérapeutique potentielle du sous type luminal B.
(2017-04-20) BELHADJ AMINA; Encadreur: KLOUCHE LYNDA
ملخص مقدمة: سرطان الثدي هو مرض معقد وغير متجانس. عدم التجانس النسيجي لسرطان الثدي، مسؤول جزئيا عن فشل العلاج الشيء الذي يعكس طبيعته الجزيئية المعقدة. في هذا السياق ناقشنا سرطان الثدي من الناحية الجزيئية. الأهداف: تحديد أفضل وتصنيف أنواع فرعية مختلفة لسرطان المختلفة بيولوجيا و بالتالي تتطلب استراتيجيات علاجية مختلفة لتحسين رعاية المرضى. تحديد بروتينات جديدة يمكن أن تكون ذات أهمية كبيرة من الناحية العلاجية. المواد والطرق: أجريت دراسة على 829 مريضة في المنطقة الشمالية الغربية من الجزائر، شخصت إصابتهن بسرطان الثدي بين يناير 2008 وديسمبر 2013حيث تم تصنيف سرطان الثدي تصنيفا جزيئيا. وأخيرا، تم تحديد تعبير البروتين RAB25 . ثم أنشانا ارتباطات بين مختلف المعلومات الطبية للمرضى و قدرنا البقاء على قيد الحياة من دون ورم خبيث باستخدام كابلان ماير. النتائج: تقدمت النساء إلى مصالح العلاج في المرحلة العدوانية لسرطان الثدي ، وأظهرت 62٪ منهم تسلل الغدد الليمفاوية الإبطية. 283 ورم (41.86٪) ينتمي إلى صنف A luminal ، 102 ورم (15.09٪) luminal B ، 91 ورم (13.46%) HER2 و 200 ورم (29.58٪) من صنف TNBC. ارتبطت أورام luminal B بشكل كبير مع وجود العقد الإبطية المعنية .هذه الأورام لها أعلى حجم الورم (T4) ونسبة أكبر منSBR بالمقارنة مع الصنف. luminal A كان البقاء على قيد الحياة من دون ورم خبيث خلال 5 سنوات: 70٪ . يرتبط التعبير المرتفع للبروتين 25 RAB على وجه التحديد مع الأورام من الصنف luminal B. الخلاصة: أكدت دراستنا عدوانية أورام المرضى الذين يعانون من سرطان الثدي في المنطقة الشمالية الغربية من الجزائر ربما بسبب عدم الكشف المبكر في هذه المنطقة. قمنا بتحديد فئات جديدة من سرطان الثدي في مجموعات ظاهريا متجانسة ، ولكن غير متجانسة من الناحية التطورية. يمكن أن يكون RAB25 هدفا علاجيا محتملا للأورام من النوع luminal B الذين لم يتم تأسيس أي علاج مستهدف لهم بعد. هدف علاجيRAB 25 -luminal B - الكلمات المفتاحية: سر طان الثدي- الأنواع الجزيئية ----------------------------------------------------------------------------------- RESUME Introduction : Le cancer du sein est une maladie complexe et hétérogène sur le plan biologique. Cette hétérogénéité tumorale, en partie responsable des échecs thérapeutiques serait le reflet de plusieurs entités cliniques dans les cancers du sein. Les différentes classes moléculaires permettent de définir des sous-types de cancer du sein de pronostics distincts pouvant bénéficier d’une prise en charge thérapeutique plus individualisée. Objectifs : Afin de mieux comprendre la biologie tumorale inhérente à chaque sous-type moléculaire nous avons, dans un premier temps, procédé à la classification des cancers du sein par une approche immunohistochimique comme technique substitutive à l’analyse par microarray. Dans un second temps, nous avions pour objectif, d’identifier des marqueurs dérégulés et cibles thérapeutiques potentielles spécifiques de sous-types moléculaires particulièrement agressifs de cancer du sein et pour lesquels aucune thérapie ciblée n’existe à ce jour, tels que les luminaux B. Matériel et méthodes : Une étude rétrospective a été menée sur 829 patientes de la région nord-ouest de l’Algérie, diagnostiquées avec un cancer du sein, entre janvier 2008 et décembre 2013. Le profil d’expression de différents marqueurs a permis de définir et de classer les cancers du sein. Enfin, le statut protéique de RAB25 a été déterminé par immunohistochimie. Des corrélations aux données histo-cliniques ont été établies. La survie sans métastase a été estimée en utilisant la méthode de Kaplan-Meier. Résultats : Les patientes ont été diagnostiquées à un stade agressif (grades SBR II et III), 62% d’entre elles présentaient une infiltration des ganglions axillaires et 11% avaient des métastases à distance. 283 tumeurs (41.86%) appartenaient au sous-type luminal A, 102 (15.09%) au sous-type luminal B, 91 (13.46%) au sous-type HER2+ et 200 (29.58%) étaient des tumeurs triples négatives (TNBC). Les tumeurs de sous-type luminal B étaient significativement associées à la présence de micrométastases, à une taille tumorale plus élevée (T4) et une plus grande proportion de haut grade histologique (SBR III) est retrouvée en comparaison aux tumeurs luminales A. La survie sans métastase à 5 ans était 70% (95CI= [0.62-0.78]). La surexpression de RAB 25 est spécifiquement associée au sous-type luminal B (p=0.01). Conclusion : Notre étude a confirmé le caractère agressif des cancers du sein au niveau de la région nord-ouest de l’Algérie vraisemblablement par manque d’un dépistage précoce. Nous avons défini de nouvelles classes de cancer du sein dans des groupes de tumeurs d’apparence histo-clinique homogènes, mais hétérogènes sur le plan évolutif. Une telle classification moléculaire aura donc une implication thérapeutique. De plus, RAB25 pourrait constituer une cible thérapeutique potentielle intéressante et permettrait d’aboutir au développement d’une thérapie ciblée améliorant ainsi la prise en charge des patientes ayant un cancer du sein de sous-type luminal B.
Effets des vitamines (C, E), du NADH et des acides gras sur la prolifération lymphocytaire, la sécrétion des cytokines et le statut redox chez les patients atteints de maladies métaboliques.
(2017-05-15) MERAOU Asmaa; Encadreur: MERZOUK Hafida; Co-Encadreur: BELBRAOUT Slimane
Résumé (Français et/ou Anglais) : Résumé Le Diabète de type 1 et 2, l’hypertension, et l’obésité sont associés à de nombreuses complications notamment un dysfonctionnement du système immunitaire et un stress oxydatif. Les objectifs de ce travail de doctorat sont de déterminer les conséquences métaboliques de ces pathologies et les effets in vitro de certaines vitamines (C, E) du NADH et de certains acides gras présents dans les huiles (huile d’olive, lin, nigelle et tournesol) sur la prolifération lymphocytaire, la sécrétion des cytokines et le statut redox intracellulaire. Des prélèvements sanguins sont réalisés chez 138 patients de sexe masculin dont 26 diabétiques de type 1, 15 diabétiques de type 2, 15 hypertendus, 32 obèses et 50 hommes témoins. Ces échantillons sont utilisés pour les dosages des paramètres biochimiques (glucose, urée, créatinine, triglycérides, cholestérol), et des marqueurs du statut oxydant/antioxydant (enzymecatalase, glutathion, MDA, protéines carbonylées). Les lymphocytes T sont isolés à partir du sang par centrifugation sur gradient de densité de l’histopaque, puis incubés en présence d’un agent mitogène (la Concanavaline A), des vitamines, un coenzyme et des acides gras pendant 48 heures à 37°C et 5% CO2, et sont par la suite utilisées pour analyser la prolifération, les cytokines et le statut redox intracellulaire. Notre travail révèle l’existence de perturbations du métabolisme glucidique et lipidique associées à un déséquilibre de la balance oxydante/antioxydante chez les hommes diabétiques, hypertendus et obèses. De plus, les effets immuno-stimulateurs des vitamines C, E et du NADH sur la prolifération et la fonction lymphocytaire, en plus de la restauration du statut redox sont mis en évidence aussi bien au cours du diabète que de l’hypertension et l’obésité. Nos résultats montrent aussi que les huiles ont des effets modulateurs différents selon le type de pathologies étudiées, associés à un effet antioxydant et anti-inflammatoire notamment en présence de l’huile de lin , de nigelle et d’olive. En conclusion, la supplémentation en vitamines, en NADH et en acides gras peut être bénéfique avec des effets positifs sur la fonction lymphocytaire et le stress oxydatif au cours des maladies métaboliques. Mots-clés : Diabète sucré, Hypertension, Obésité, Vitamines (C, E), NADH, Huile de lin, Huile de nigelle, Huile d’olive, Huile de tournesol, Lymphocytes, Cytokines, Statut redox.
L’INTERET DU DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE; RADIOLOGIQUE ET ANATOMO-PATHOLOGIQUE DANS LA PRISE EN CHARGE THERAPEUTIQUE DES TUMEURS DE LA THYROÏDE DANS L’OUEST ALGERIEN
(2017-05-18) BENDOUIDA Achwak Fatna; Encadreur: MOULESSEHOUL Soraya
الملخص (بالعربية) : الغدة الدرقية هي الغدة الصماء الأكثر تعرضا للأمراض التي تؤثر على وظيفتها (فرط نشاط الغدة الدرقية، خمول الغدة الدرقية) أو هيكلها (تضخم الغدة الدرقية، العقيدات، السرطان). فيما يخص بحثنا لقد تطرقنا لدراسة العقيدات الدرقية الحميدة و الخبيثة و التي تعتبر تورم شائع جدا عند الإناث. هذا الاعتلال قد يكون في 90٪ من الحالات عقيدة حميدة وفي 10٪ من الحالات سرطان. الهدف من هذا البحث العلمي هو أولا معرفة المواصفات الوبائية ,البيولوجية , السريرية والخلوية النسيجية لعقيدات الغدة الدرقية الحميدة والخبيثة. من جهة أخرى, هذه الدراسة تسمح بتسليط الضوء على أهمية كل وسائل التشخيص المخبرية والإشعاعية والتشريحية حتى نستطيع أن نتحكم علاجيا في أورام الغدة الدرقية. لقد أجريت الدراسة الوبائية الطولية بأثر رجعي على مدى عشر سنوات على المرضى الذين يعانون من أورام حميدة (449 شخص) وخبيثة (78 شخص). المرضى تم تجنيدهم في المستشفى الجامعي بسيدي بلعباس التي تبقى دائما منطقة موبوءة. أظهرت النتائج أن متوسط عمر المرضى الذين خضعوا للعملية الجراحية بسبب إصابتهم بالعقيدات الحميدة كان 45.07 ± 13.43 (16-83 سنة) حيث بلغت نسبة الجنس 12.6. بالإضافة إلى ذلك، سجلت نتائجنا بأن العقيدات الدرقية الحميدة قد تكون متكررة و وراثية. لاحظنا أيضا أن مدة تكرار العقيدات الدرقية الحميدة كانت 5 سنوات في المرضى الذين توقفوا عن العلاج الهرموني لمدة عام. هناك علاقة جد قوية مابين أشكال العقيدات الدرقية الدافئة والباردة والساخنة و موقع تمركزها (ɸ = 1.027). أشارت التحليلات الإحصائية لدينا أيضا بأن مقر العقيدات الدرقية الحميدة يتأثر بطبيعتها إن كانت صلبة ، كيسية أو مختلطة . (ɸ = 1.307) وأظهرت دراستنا كذلك أن درجة الارتباط بين الأشكال الدافئة، الباردة والساخنة والصلبة والسائلة والمختلطة إيجابية للغاية . (ɸ = 1.282)أما تشخيص العقيدات الدرقية الخبيثة فلقد تم عند المرضى بمتوسط عمر 45.60 ± 15.71 (85-13) سنوات وبنسبة جنس مقدارها.4.2. من خصائص العقيدات الخبيثة أنها منعزلة مع إفراز طبيعي للغدة الدرقية, ناقصة الصدى، الصلبة والباردة. النهج العلاجي البيولوجي والإشعاعي والخلوي حتى النسيجي لديه الآن مكانا مركزيا في المسار العلاجي للمرضى المصابين بعقيدات حميدة و خبيثة على مستوى الغدة الدرقية التي تشكل مشكلة في الصحة العمومية. ولذلك، سيكون من المثير للاهتمام أن يتم استخدام المهارات المتعددة (علماء الأحياء، الأطباء المختصين في الغدد الصماء و الأشعة والجراحين والأطباء المختصين في التشريح المرضي) لتحسين الإدارة العلاجية للمرضى الذين يعيشون في المناطق الموبوءة مثل غرب الجزائر (منطقة سيدي بلعباس). الكلمات المفتاحية : الغدة الدرقية, العقيدات,السرطان, الوبائية, وسائل التشخيص. ----------------------------------------------------------------------------------- Résumé (Français et/ou Anglais) : La thyroïde est la glande endocrine la plus souvent affectée par les maladies qui touchent à sa fonction (hyperthyroïdie, hypothyroïdie) ou à sa structure (goitre, nodule, cancer). Dans notre investigation, nous avons ciblé le nodule bénin et malin de la thyroïde qui est une tuméfaction très fréquente essentiellement féminine. Cette endocrinopathie peut à 90% des cas être une lésion bénigne et dans 10 % des cas être un cancer. Notre objectif consiste d’une part, à décrire les aspects épidémiologiques, biologiques, cliniques et cyto-histopathologiques des nodules bénins et malins et d’autre part, vise à mettre en évidence l’intérêt du diagnostic biologique, radiologique et anatomopathologique dans la prise en charge thérapeutique des tumeurs de la thyroïde. Une étude épidémiologique rétrospective longitudinale sur dix ans a été réalisée sur des patients atteints de pathologies, bénignes (449 individus) et malignes (78 individus). Les patients ont été recrutés au CHU de Sidi Bel Abbès qui reste une région endémique. Les résultats obtenus montrent que l’âge moyen des patients opérés pour nodules bénins est de 45.07 ± 13.43 (16 à 83 ans) avec un sex-ratio de 12.6. En outre, nos résultats enregistrent que les nodules bénins pourraient être récurrents et héréditaires. Nous avons remarqué aussi que la durée de la récurrence du nodule bénin est de 5 ans chez des patients qui ont arrêté l'hormonothérapie pendant un an. Il existe une très forte association entre les formes isofixante froide et chaude du nodule bénin et son siège (ɸ = 1.027). Nous avons constaté aussi que le siège du nodule bénin est influencé par sa nature soit solide, kystique ou mixte (ɸ = 1.307). Une forte liaison est remarquée entre les formes isofixante, froide chaude et solide, liquide, mixte (ɸ = 1.282). Cependant, les nodules malins sont diagnostiqués chez des patients avec un âge moyen de 45.60 ± 15.71 (13 à 85 ans) et un sex-ratio de 4.2. Les caractéristiques de nodules malins sont de type solitaire en euthyroïdie, hypoéchogène, solide et froide. L’approche biologique, radiologique, cytologique voire histologique tient désormais une place centrale dans le chemin thérapeutique des patients atteins de nodule thyroïdien bénin et malin qui représente un problème de santé publique. C’est pourquoi, il serait intéressant de faire appel à des compétences multiples (biologistes, endocrinologues, radiologues, cytologistes, chirurgiens et anatomopathologistes) pour une meilleure prise en charge thérapeutique des patients vivant dans les zones endémiques comme l’Ouest de l'Algérie (la région de Sidi Bel Abbès). Mots clés : Thyroïde ; Nodule ; Cancer ; Epidémiologie ; Diagnostic.
Isolement et caractérisation des rhizobactéries promotrices de la croissance des plantes capables de lutter contre le Fusarium
(2017-05-22) LARADJ ZAZOU Khalida; Encadreur: ABBOUNI Bouziane
Résumé (Français et/ou Anglais) : L’utilisation de certains microorganismes non pathogènes (Plant Growth Promoting Rhizobactéria, PGPR) en tant que biopesticides est une technologie émergente et écologiquement compatible considérée comme alternative prometteuse aux pesticides de synthèse. L’objectif de ce présent travail est l’isolement d’une large gamme de bacteries rhizosphériques manifestant une activité antifongique vis-à-vis de Fusarium oxysporum f. sp radicis lycopersici et promotrices de la croissance de cultures de la tomate. Le screening primaire effectué à partir de la rhizosphère de tomate, prélevée dans la région de Mehdia (Tunisie), sur un milieu de culture gélosé a permis l’isolement de vingt deux (22) souches bactériennes. Le screening secondaire des souches isolées à partir de la rhizosphère a permis la sélection de quatre souches bactériennes stimulatrices de la croissance de la culture de la tomate in vivo. L’identification phénotypique, moléculaire des quatre souches bactériennes, sélectionnées stimulatrices de la croissance de la tomate in vivo et la caractérisation de leur potentiel PGPR in vitro par l’étude de la production de l’acide salicylique, de l’acide indole acétique, la solubilisation du phosphate, la fixation de l’azote atmosphérique et l’activité antagoniste vis-à-vis de Fusarium oxysporum f. sp radicis lycopersici a été effectué. L’amplification du fragment d’ADN codant la région 16S ARN des quatre souches bactériennes, sélectionnées stimulatrices de la croissance de la tomate in vivo et leur séquençage ont révelé leur appartenance aux espèces suivantes : MR1 : Acidovorax avenae subsp. avenae, ME1 : Pseudomonas putida, MS3 : Microbacterium arthrosphaerae et MR6 : Rahnella aquatilis. Par ailleurs, les quatre souches ont manifesté une activité antagoniste vis-à-vis de Fusarium oxysporum f. sp radicis lycopersici in vivo. L’étude de la résistance systémique des cultures de la tomate, traitée par le Fusarium oxysporum f. sp radicis lycopersici et induite par les quatre souches sélectionnées est basée sur la réduction des symptômes de maladie et l’accumulation d’un composé de type phytoalexine dans les tissus des tomates traitées, analysé par (HPLC). L’inocuation des cultures de la tomate avec les quatres souches sélectionnées a montré une excellente résistance de la tomate vis-à-vis de Fusarium oxysporum f. sp radicis lycopersici, traitées par les deux isolats Acidovorax avenae subsp. avenae et Pseudomonas putida. A cet effet, les bactéries sélectionnées stimulatrices de la croissance pourront substituer l’utilisation courante des engrais chimiques xénobiotiques et nocifs.
Caractérisation phytochimique et évaluation du potentiel antioxydant, antimicrobien et anti-inflammatoire de Salvia argentea
(2017-12-07) TEHAMI Wafâa; Encadreur: BENALI Mohamed
Résumé (Français et/ou Anglais) : Le présent travail contribue à la valorisation des feuilles et des racines de la sauge argentée (Salvia argentea) de la région de Sidi Bel Abbès et ce par un screening phytochimique, la détermination des métabolites primaires et secondaires, l’évaluation de l’activité antioxydante, antimicrobienne et anti-inflammatoire. Les analyses physico-chimiques effectuées ont révélé des teneurs appréciables en métabolites primaires. Cette plante renferme respectivement pour les feuilles et les racines, une humidité de 9,50±0,01% et 8,63±0,16%, un taux de cendres de 14,68 ± 0,10% et 9,03 ± 0,04% et un taux de matière de 2,92±0,11% et 3,94±0,05%. Les parties aériennes ainsi que souterraines de S. argentea, possèdent respectivement des teneurs de 10,73±0,18% et 5,23±0,32% en protéines. En revanche une pauvreté en sucres au niveau des racines a été constatée (0,15±0,12%) par rapport aux feuilles (4,13±0,04%). Le screening préliminaire des métabolites secondaires des deux parties étudiées a permis de mettre en évidence la présence de quelques groupes chimiques. Ces derniers ont été quantifiés et les analyses ont concerné les polyphénols, les flavonoïdes et les tanins condensés. Les teneurs moyennes en polyphénols des feuilles et des racines dans les extraits méthanolique et aqueux sont respectivement de 87,13±0,32 – 55,64±0,35 mg équivalent acide gallique (EAG)/g et 71,80±0,79 – 48,20±0,79 mg EAG/g. Pour les flavonoïdes les teneurs sont aussi respectivement de 59,97±0,21 – 31,22±0,49 mg équivalent catéchine (EC)/g et 44,16±0,60 – 18,12±0,54 mg EC/g et pour les tanins de 3,70±0,09 – 5,58±0,13 mg EC/g et 4,01±0,16 – 5,83±0,09 mg EC/g. L’activité antioxydante a été évaluée par la méthode de réduction du fer FRAP et la méthode de piégeage de radicaux libres DPPH. Les extraits testés présentent des activités antioxydantes appréciables et fonction du contenu en principes actifs. Les IC50 varient de 45,42 ± 0,46 à 416,12 ± 0,26 μg/ml. Par ailleurs l’activité antimicrobienne des extraits méthanolique et aqueux vis-à-vis de sept souches bactériennes et une levure s’est révélée modérée en fonction de l’organe considéré, du type d’extraction, de la concentration et de la souche utilisée. Dans notre cas tous les extraits se sont révélés inactifs vis-à-vis de la souche Pseudomonas aeruginosae. L’effet anti-inflammatoire, a montré des atténuations des œdèmes induit par la carragénine (1%) chez les rats Wistar traités avec les extraits méthanoliques de feuilles et de racines de S. argentea. Cet effet est comparé à celui du Diclofenac avec des analyses de paramètres de l’inflammation aigue dont les leucocytes, les plaquettes, la CRP et l’albumine. Ces derniers confirment l’état inflammatoire engendré par la carragénine et son atténuation par l’administration des extraits de la plante. En définitive, S. argentea peut constituer une source potentielle en antioxydants utilisés à des fins thérapeutiques. Mots clés : Feuilles, Racines, Salvia argentea, Métabolites primaires, Métabolites secondaires, Activité antioxydante, Activité antimicrobienne, Activité anti-inflammatoire.
Rôle des lipoprotéines de haute densité dans l’inhibition des interactions macrophages/lymphocytes T CD4+ au cours du diabète de type 1.
(2018-02-15) BENGHALEM Ibtissem; Encadreur: ARIBI MOURAD
Résumé Introduction : Le diabète de type 1 est une maladie inflammatoire des îlots pancréatiques. Les lymphocytes T CD4+ et les macrophages sont principalement impliqués dans la destruction auto-immune des cellules β dans le Diabète de type 1 (DT1). Bien que certains travaux aient postulé l’existence d’un effet inhibiteur du HDL sur la capacité des cellules présentatrices d’antigènes à stimuler l'activation des lymphocytes T, aucune investigation démontrant l’impact du HDL sur le DT1 n’a été menée à ce jour. Objectif : Le but cette étude consiste, d’une part à examiner l'effet ex vivo des lipoprotéines de haute densité (HDL) sur les activités fonctionnelles des macrophages et d’autre part à étudier leurs capacités à réguler la production des cytokines dans les co-cultures de macrophages-cellules T dans le diabète précoce de type 1. Matériels et méthodes : L'effet du HDL a été examiné aussi bien sur des macrophages que sur des co-colutures macrophages /lymphocytes T CD4 + isolés, chez des donneurs volontaires sains et chez des diabétiques de types 1 nouvellement diagnostiqués. Certains des dosages ont été effectués sur les surnageants, d’autres sur les lysats cellulaires traités ou non avec le HDL. Les niveaux de production des cytokines, d’arginase, de l’activité fonctionnelle du macrophage et des quantités relatives des transducteurs de signal STAT4/STAT6 ont été réalisés sur des co-cultures. Résultats: les résultats des essais ont montré que les niveaux de production des cytokines pro-inflammatoires (IL-1β, d'IL-2, d'IFN-γ) ; ceux des paramètres du burst oxydatif (NO et H2O2), ceux de la phagocytose et de la destruction bactérienne ainsi que ceux de la phosphorylation de STAT4 (p-STAT4, Tyr693), ont été réduit de manière significative dans les co-cultures de macrophages/lymphocyte T CD4+ des DT1 traité avec HDL par rapport aux contrôles sains (p<0.01). Les résultats ont montré en outre, que le traitement par HDL a induit une légère augmentation des taux de ifCa2 + dans les co-cultures de DT1 par rapport aux témoins sains, malgré une différence peu significative (p>0,05). Ils ont montré d’autre part que le traitement par HDL a induit une augmentation significative sur la production des cytokines anti-inflammatoires (IL-4, et IL-10), sur l’activité d'arginase et sur la phosphorylation des p- STAT6 (Tyr641) dans la co-culture de cellules de DT1 et de témoins sains par rapport à celle des cellules non traitées par HDL (pour toutes les Comparaisons, (p <0,001)). Conclusions : Les résultats obtenus sont prometteurs car ils permettent de démontrer pour la première fois que le HDL peut inverser à la fois les activités fonctionnelles des macrophages et la réponse immuno-inflammatoire au début du DT1. Ces résultats précurseurs devraient ouvrir la voie à des essais thérapeutiques à court et à moyen terme. Mots clé : HDL, diabète de type 1 humain, macrophages / lymphocytes T CD4 +, activités fonctionnelles des macrophages, cytokines pro-inflammatoire et anti-inflammatoire, p-STAT4 et p- STAT6 ----------------------------------------------------------------------------------- Abstract Background. Both CD4+ T cells and macrophages are mainly involved in the autoimmune-mediated β-cells destruction in type 1 diabetes (T1D). The aim of this study was to examine the effect of HDL on functional activities of macrophage and its ability to regulate the production of cytokines in autologous mixed macrophage/CD4+ T cells at the recent-onset human type 1 diabetes. Methods. Cell samples were isolated from volunteers with recent-onset T1D or healthy controls. Results. The levels of the production of IL-1β, IL-2, IFN-γ, nitric oxide (NO), and hydrogen peroxide (H2O2) were significantly increased in the co-culture of T1D cells when compared to that of cells from healthy controls. Similarly, those of intracellular free calcium ions (ifCa2+) were slightly, but not significantly increased (p > 0.05). Conversely, macrophage exhibited significantly decreased levels of the relative tyrosine phosphorylation of STAT6 (p-STAT6, Tyr641) in culture of T1D cells than in that of cells from healthy controls; while those of p-STAT4 (Tyr693) were significantly increased. Likewise, the levels of IL-4 and IL-10 were significantly decreased in the co-culture of T1D cells compared to co-culture of cells from healthy controls. Additionally, HDL treatment significantly down-regulated the production of IL-1β, IL-2, IFN-γ, NO, H2O2, phagocytosis, bacterial killing, the relative tyrosine phosphorylation of macrophage-expressed STAT4 (p-STAT4, Tyr693), as well as the ratio of IL-1β/IL-10, NO production/arginase activity, p-STAT4/p-STAT6, IFN-γ/IL-4, IFN-γ/IL-10, and the combined proinflammatory (PICs)/anti-inflammatory (AICs) cytokines. Moreover, HDL treatment significantly up- regulated the production of IL-4, IL-10, arginase activity, and p-STAT6 (Tyr641) (for all comparisons, p < 0.001). Conclusions. We show for the first time that HDL may reverse both the functional activities of macrophages and immunoinflammatory response during reciprocal macrophage-CD4+ T cell crosstalk at the beginning of T1D. These findings should open the way for therapeutic trials in the short- and medium-term. Keywords. Autologous mixed macrophage/CD4+ T cells, HDL, Human type 1 diabetes, Macrophage functional activities, Proinflammatory and anti-inflammatory, cytokines, p-STAT4 and p-STAT6
Isolement et caractérisation des bactéries productrices de protéases à intérêt biotechnologique
(2018-02-19) BOUKHTACHE HADJER; Encadreur: ABBOUNI BOUZIANE
Résumé (Français et/ou Anglais) : RESUME Les producteurs d’enzymes ont effectué des recherches afin de trouver des alternatifs moins dispendieux en utilisant les sols riches en protéines comme substrat prometteur économique, afin de stimuler la production à des coûts moindres et valoriser les sous produit issu du sol. Dix (10) échantillons de sols riches en protéines où les déchets sont soumis à une fermentation naturelle, prélevés dans les environs de la ville de Chlef, en Algérie à partir des sols entourant, les laiteries, les abattoirs, les usines des alimentations de bétails et les sols riches en matières organiques en décomposition, ont fait l’objet d’une analyse microbiologique à fin de déterminer la diversité des bactéries productrices de la protéase. Le screening primaire a permis l’isolement de 115 souches protéolytiques, parmi lesquelles, 15 sont sélectionnées dans le screening secondaire comme les plus performantes et sont retenues pour être identifiées dans un premier temps par une caractérisation phénotypique, suivie d’une caractérisation génotypique par la technique de la PCR et le séquençage du gène codant l’ADNr 16S. L’utilisation de l’outil de la biologie moléculaire a permis une identification génétique des souches sélectionnées productrices de la protéase et l’analyse phylogénétique. Dans le but d’augmenter la production de la protéase chez les souches isolées sélectionnées, un certain nombre de paramètres tels que la source de carbone et d’azote, la température, le pH, le temps de réaction et la concentration en inoculum sont optimisés. Les résultats obtenus ont montré que chez les souches (T₂, T₂op, TB₂op, T₂', AH₂(-2), Xg₄, P₂op, E₃S₃P, H₁(-6), NB₁op,Y₄, LV₂, E₃S₄p, E₃S₁IBN et P₁op) une production maximale est obtenue après 48heures d’incubation lors de leurs inoculation sur un milieu de culture de production contenant : 1g/l glucose, 1g/l amidon, 1g/l caséine, 1% peptone et 2% d’inoculum avec des taux de production de (1,60, 1,45, 1,50, 1,80, 1,65, 1,30, 1,30, 1,70, 1,50, 1,65, 1,62, 0,95, 1,55, 1,48et 0,60 UI /ml) respectivement. L’activité protéolytique est mesurée et l’analyse de la pureté est ensuite effectuée par SDS-PAGE en conditions dénaturantes révélant l’apparence de bandes protéiques de poids moléculaires différents suggérant que ces enzymes sont homogènes, ce qui confirme que les souches isolées ont des activités protéolytiques différentes. Mots clés: Protéase, caractérisation, sols riche en protéines, le gène 16SrDNA, optimisation, SDS-PAGE. ABSTRACT Producers of enzymes are researching to find cheaper alternatives using protein rich soils as a promising economic substrate, to stimulate production at lower costs and to value the byproducts from soil. Ten (10) samples of protein rich soils where the waste is subjected to natural fermentation collected in the vicinity of the town of Chlef, Algeria from soils surrounding, dairies, slaughterhouses, cattle feeding factories and decomposing organic matter rich soils, were subjected to microbiological analysis in order to determine the diversity in protease producing bacteria. The primary screening allowed the isolation of 115 bacterial strains, from which 15 were selected in the secondary screening as the most powerful isolates and were chosen to be identified initially by a phenotypic characterization, followed by genotypic characterization by PCR and the sequencing of the gene encoding 16S rDNA. The use of molecular biology tool enabled a genetic identification and phylogenetic analysis of the selected strains producing proteases. In order to increase the production of proteases in selected high performance strains, a number of parameters such as carbon and nitrogen source, temperature, pH, reaction time and inoculums concentration have been optimized. The results obtained showed that maximum production (1,60, 1,45, 1,50, 1,80, 1,65, 1,30, 1,30, 1,70, 1,50, 1,65, 1,62, 0,95, 1,55, 1,48 and 0,60 UI /ml ) respectively for the strains (T₂, T₂op, TB₂op, T₂', AH₂(-2), Xg₄, P₂(op), E₃S₃P, H₁(-6), NB₁op, Y₄, LV₂, E₃S₄p, E₃S₁IBN and P₁op) is obtained after 48 hours of incubation during inoculation of the strains on a production medium containing, 1 g/l glucose, 1g/l starch, 1g/l casein, 1% peptone and 2% of inoculum. The proteolytic activity is measured and the purity analysis is then carried out by SDS-PAGE under denaturing conditions revealing the appearance of protein bands of different molecular weights suggesting that these enzymes are homogeneous, confirming that our strains have different proteolytic activities. Key words: Protease, characterization, proteins rich soils, 16S rDNA gene, optimization, SDS- PAGE.
Caractérisation phénotypique et moléculaire des souches de bactéries lactiques productrice de bactériocine
(2018-02-26) KHODJA Badra; Encadreur: BENINE Mohamed El Amine
Résumé (Français et/ou Anglais) : L’intégration de nouvelles souches lactiques provenant de différents écosystèmes est actuellement utilisée pour l’augmentation de la durée de bioconservation des aliments. Outre, l’activité probiotique de certaines bactéries lactiques est exploitée dans la production des aliments à caractères préventif et thérapeutiques. L’objectif de ce présent travail est l’isolement et caractérisation de bactéries lactiques productrices de bactériocine du lait maternel, l’optimisation de certain facteurs tels que le pH, la température d’incubation impliquées dans la production de la bactériocine. L’isolement des bactéries lactiques productrices de bactériocine est effectué à partir d’échantillons prélevés du lait maternel. Le criblage primaire des souches lactiques à partir de lait maternel, sur un milieu de culture gélosé a permis l’isolement de 28 souche lactique. Le criblage secondaire des bactéries isolées du lait maternel a permis la sélection de 13 souches lactique antagoniste ont été identifiées sur les plans physiologique et biochimique. L’étude des interactions a révélé un pouvoir inhibiteur de quatre souchessélectionnées fortement inhibitrices vis-à-vis de Staphylococcus aureus UT 602, S.aureus CECT 86T, S.aureus ATCC 25923, S.aureus ATCC 43300 et E. coli ATCC 25922. L’effet antagonique a été évalué par des techniques de diffusion sur gélose (méthode de double gélose, méthodes des puits). L’amplification du fragment d’ADN codant la régions 16S ARN des quatre souches lactiques, sélectionnés hautement antagoniste et leur séquencage ont révélé leur appartenance aux espèces suivants : LbL15 :Enterococcusfaecium, LbC11 :Enterococcusfaecium, LbC3 :Lactobacillus brevis, LbL4 :Lactobacillus sakei. En soustrayant l’effet du pH, du H2O2 l’inhibitionreviendrait à des facteurs antimicrobiens de nature protéique (bactériocine) comme il a été révélé avecLactobacillus brevis (LbC3). L’optimisation de la production de la bactériocine sur milieu MRS est rendue meilleure à un pH de 6 et à une température de 30°C. La cinétique de croissance d’E.coli ATCC25922 en présence et en absence de la bactériocine produite par L.brevis (LbC3) a montré que la biomasse bactérienne a diminué progressivement après l’ajout des bactériocines. Les résultats des tests technologiques de cette souche sont satisfaisants pour une utilisation industriellecar elle possède une activité protéolytique et un bon pouvoir acidifiant. L’antibiotype de la souche LbC3 montre 50% de sensibilité vis-à-vis des antibiotiques tests. L’étude des interactions inhibitrices de la souche LbC3 à l’égard de bactéries pathogènes envisagera leur utilisation à des fins technologiques.
Caractérisation physicochimique et évaluation du potentiel antioxydant, antimicrobien et anti-inflammatoire de la microalgue Nannochloropsis gaditana
(2018-04-18) KHERRAF Asmaa; Encadreur: BENALI Mohammed
Résumé (Français et/ou Anglais) : Cette étude a pour l’objectif de déterminer la teneur en métabolites primaires et secondaires de la microalgue Nannochloropsis gaditana et d’évaluer l’activité antioxydante, antimicrobienne, ainsi que le potentiel anti-inflammatoire des extraits ethanolique (EENg) et méthanolique (EMNg). Le profil nutritionnel par rapport à la matière sèche montre une richesse en protéines (13.38±0.26%), en lipides (7±1%) et en sucres (7.13±0.23%). L’humidité et les minéraux constituent respectivement 9.33±1.15% et 6.4±0.23%. L’estimation quantitative des métabolites secondaires a montré que les EENg et EMNg sont riches en ces composés avec des proportions respectivement de 41.53±0.42 et 38.74±0.33 mg EAG/g PS pour les polyphénols ; 19.82±1.66 et 18.61±1.45 EQ/g PS pour les flavonoïdes et 0.35±0.05 et 0.50±0.08 mg acide tannique/g PS pour les tanins. Le pourcentage d’inhibition par le test DPPH est de 22.37±3.5% et 12.27±1.4% pour EENg et EMNg respectivement avec des extraits à la concentration de 0.5 mg/ml. Les pouvoirs réducteurs de EENg, EMNg et de l’acide ascorbique déterminés par la méthode FRAP sont exprimés en densité optique et sont respectivement de 0.031±0.023 ; 0.029±0.009 et de 0.439±0.035 unités de densité optique (DO) à la concentration de 0.15 mg/ml. Ces valeurs deviennent aussi respectivement de 0.349±0.037 ; 0.414±0,012 et 1.15±0.07 D à la concentration de 5 mg/ml. Les résultats de l’activité antimicrobienne des EENg et EMNg sur sept souches bactériennes et une souche de levure mettent en évidence une forte inhibition surtout des bactéries Gram+ avec un diamètre qui varie de 8.5±0.7 à 20.5±0.7 mm. En revanche, ils ont une activité modérée vis-à-vis les bactéries Gram- et aucun effet sur La levure Candida albicans. L’évaluation de l’activité anti-inflammatoire in vivo de EENg montre une inhibition de l’œdème de la patte induit par la carragénine chez les rats Wistar avec un taux moyen de 70.53 %. De plus on note une augmentation de l’albumine sérique, une diminution de la C-réactive protéine (CRP) par rapport à l’état initial ainsi qu’une diminution remarquable des leucocytes et des plaquettes par rapport au lot traité avec du Nacl 0,9%. En définitive, la microalgue Nannochloropsis gaditana peut être recommandée pour ses vertus nutritionnelles et thérapeutiques importantes.